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![Ti-O膜表面固定不同手性胱氨酸及其催化釋放一氧化氮對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞相容性影響的研究.pdf_第1頁(yè)](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/14/17/b0a95505-270d-40ad-b84d-aae238a2fcc3/b0a95505-270d-40ad-b84d-aae238a2fcc31.gif)
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1、生物體系的各層次均具有典型的手性特征,不同手性的分子往往具有不同的生物學(xué)功能。胱氨酸分子中二硫鍵具有催化內(nèi)源性一氧化氮供體釋放一氧化氮功能,本論文將不同手性的胱氨酸—L型胱氨酸和D型胱氨酸固定在Ti-O膜表面,考察不同手性胱氨酸固定對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞粘附、增殖和遷移的影響,以及通過(guò)該方法構(gòu)建的具有與正常內(nèi)皮細(xì)胞分泌一氧化氮速度相當(dāng)?shù)囊谎趸尫艑?duì)內(nèi)皮細(xì)胞上述行為以及分泌一氧化氮功能的影響。
首先采用非平衡磁控濺射法在單晶硅表面制備Ti
2、-O膜,然后在Ti-O膜表面沉積聚多巴胺,利用聚多巴胺作為中間連接層,將不同手性的胱氨酸固定到樣品表面。利用X射線光電子能譜(XPS)、原子力顯微鏡(AFM)、水接觸角測(cè)量等方法對(duì)改性后的樣品進(jìn)行材料學(xué)的表征,利用一氧化氮體外催化釋放實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)固定不同手性胱氨酸樣品的催化能力,并且通過(guò)體外內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)固定不同手性胱氨酸樣品的生物學(xué)性能。
原子力顯微鏡(AFM)結(jié)果表明,聚多巴胺沉積到Ti-O膜表面可形成一層均勻的膜,樣品
3、表面出現(xiàn)由于多巴胺自聚合而形成的顆粒狀凸起;在固定不同手性胱氨酸之后,樣品表面的粗糙度無(wú)顯著變化;X射線光電子能譜(XPS)結(jié)果表明,聚多巴胺成功的沉積在Ti-O膜表面,同樣的,不同手性的胱氨酸成功地固定在聚多巴胺表面,并且L型和D型胱氨酸在聚多巴胺表面的固定量幾乎是一致的;水接觸角檢測(cè)結(jié)果顯示,Ti-O膜表面沉積聚多巴胺之后,樣品表面親水性增加,固定不同手性胱氨酸之后,樣品表面的親水性降低,因手性分子物理性質(zhì)相同的特點(diǎn),不同手性胱氨酸
4、樣品表面的水接觸角結(jié)果一致;然而,在吸附白蛋白過(guò)后不同手性胱氨酸樣品表面水接觸角結(jié)果出現(xiàn)了顯著的差異,這可能是白蛋白在不同手性表面的吸附行為不同造成的。
樣品催化內(nèi)源性一氧化氮供體釋放一氧化氮結(jié)果表明,兩種手性胱氨酸均能穩(wěn)定的催化釋放一氧化氮,然而,L型胱氨酸樣品催化釋放一氧化氮的速度顯著高于D型胱氨酸樣品相應(yīng)值;內(nèi)皮細(xì)胞體外靜態(tài)培養(yǎng)結(jié)果顯示,無(wú)論有無(wú)一氧化氮供體存在,L型胱氨酸樣品表面內(nèi)皮細(xì)胞的粘附量、增殖量和遷移距離均要顯
5、著高于D型胱氨酸樣品表面相應(yīng)值;不同手性胱氨酸樣品表面經(jīng)過(guò)胎牛血清浸泡后,L型胱氨酸樣品表面內(nèi)皮細(xì)胞的粘附量和增殖量要明顯高于D型胱氨酸和Ti-O膜表面相應(yīng)值;在一氧化氮供體存在的條件下,不同手性胱氨酸樣品催化釋放一氧化氮作用于內(nèi)皮細(xì)胞后檢測(cè)培養(yǎng)基中氮化合物含量結(jié)果顯示,L型胱氨酸樣品催化釋放一氧化氮作用于內(nèi)皮細(xì)胞后,內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)不同時(shí)間段后,所取得的培養(yǎng)基中硝酸鹽、亞硝酸鹽含量要顯著高于D型胱氨酸樣品相應(yīng)值。以上結(jié)果均表明,不同手性胱
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