1、新疆地處我國大西北，存在著很多的低溫環(huán)境(冰川和高山)，為尋找低溫微生物供了理想的采樣區(qū)域。低溫微生物所產的酶大多是低溫酶。低溫酶能在低溫下有效發(fā)揮催化作用的特點，使其在生物工程領域有著廣泛的應用前景。因此，對低溫微生物的研究無論在理論上還是實踐上都有重要意義。
　　 本研究從來自新疆伊犁和阿勒泰地區(qū)的75份土樣中分離出產低溫脂肪酶的低溫菌6株，經初篩和搖瓶復篩確定一株產低溫脂肪酶活力較高的菌株N6-12作為進一步研究的出發(fā)菌株

2、。菌株N6-12在完全培養(yǎng)基上20℃培養(yǎng)72 h后，菌落白色、圓形、隆起、不透明、表面光滑、濕潤、邊緣波狀。菌體革蘭氏陰性、桿狀、能運動。常規(guī)生理生化測試表明，菌株N6-12兼性厭氧，最適生長溫度25℃，40℃以上不生長，氧化酶反應陽性，接觸酶反應陽性，不產H2S，明膠液化剛性，水解淀粉陰性，反硝化作用陽性，脂酶陽性，能利用葡萄糖、果糖。經過16SrDNA鑒定，與假單胞菌有97.6％的相似度。結合形態(tài)學、生理生化特征和16SrDNA序列

3、分析結果，初步認定菌株N6-12屬于假單胞菌屬，暫命名為Pseudomonas sp.N6-12。
　　 對菌株N6-12產的脂肪酶的酶學性質進行了初步研究，結果表明該低溫脂肪酶的最適催化溫度為30℃，30℃下處理120min，酶活性仍有70％。該酶催化的最適pH6.5，在不同pH下的穩(wěn)定性試驗顯示，該酶在pH5.5～8內均較穩(wěn)定。金屬離子中，Cu2+、Fe3+對酶有較大的抑制作用，Na+則對酶有激活作用。在搖瓶發(fā)酵水平上，對假

4、單胞菌N6-12的發(fā)酵產酶條件進行了研究，確定了其最佳培養(yǎng)基成分及最佳培養(yǎng)條件。研究了不同碳源、氮源、無機鹽、產物、底物等因素對假單胞菌N6-12產酶的影響，發(fā)現(xiàn)玉米漿、豆粕粉、葡萄糖、裝填量對產酶的影響較大。對玉米漿、豆粕粉、葡萄糖、裝填量四因素各選取三個水平進行正交試驗，確定假單胞菌N6-12產酶的最佳培養(yǎng)基成分為玉米漿2％，豆粕粉3％、葡萄糖1％，裝填量為50ml/250ml。通過搖瓶發(fā)酵試驗，確定其最佳培養(yǎng)條件為：25℃，180