釀酒酵母泛素化酶與去泛素化酶基因敲除及泛素結(jié)合結(jié)構(gòu)域表達(dá)純化.pdf_第1頁(yè)
已閱讀1頁(yè)，還剩52頁(yè)未讀， 繼續(xù)免費(fèi)閱讀

下載本文檔

版權(quán)說(shuō)明：本文檔由用戶提供并上傳，收益歸屬內(nèi)容提供方，若內(nèi)容存在侵權(quán)，請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡(jiǎn)介

1、真核細(xì)胞中蛋白質(zhì)特異性降解主要由泛素-蛋白酶體系統(tǒng)(ubiquitin-proteasome system,UPS)完成。在這一途徑中,泛素首先被泛素活化酶(E1)激活,然后被轉(zhuǎn)移到泛素結(jié)合酶(E2)上;泛素連接酶(E3)識(shí)別底物和E2,并將泛素從E2上轉(zhuǎn)移到目的蛋白上;目的蛋白被泛素共價(jià)修飾,進(jìn)而被26S蛋白酶體識(shí)別并降解;底物上的泛素鏈則被去泛素化酶(DUB)解離并循環(huán)使用。已有研究報(bào)道E2,E3,DUB的功能和作用機(jī)制,但很少有系

2、統(tǒng)性研究它們的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)的報(bào)道。
　　本文利用PCR技術(shù)擴(kuò)增卡那霉素抗性基因,并轉(zhuǎn)化到釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)中,通過同源重組,分別敲除E2,E3和DUB基因。之后用G418抗性平板篩選和PCR驗(yàn)證,獲得E2,E3,DUB基因單敲除菌種。泛素結(jié)合結(jié)構(gòu)域是廣泛存在于E2,E3,DUB中的結(jié)構(gòu)域,用于識(shí)別并結(jié)合泛素。本文人工合成了泛素結(jié)合結(jié)構(gòu)域基因Q2,通過分子克隆技術(shù)插入pGEX(kt)載體,構(gòu)建原

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無(wú)特殊說(shuō)明，都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等，如果需要附件，請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙，網(wǎng)頁(yè)內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽，若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫(kù)僅提供信息存儲(chǔ)空間，僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理，對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯，并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容，請(qǐng)與我們聯(lián)系，我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評(píng)論

0/150

提交評(píng)論