1、Rab蛋白是小分子GTP結(jié)合蛋白家族(small GTP-binding proteins)Ras超家族中最大的亞家族,有大約80個(gè)成員。與Ras蛋白類似,Rab蛋白可以調(diào)節(jié)細(xì)胞分化,增殖,凋亡,DNA的復(fù)制與轉(zhuǎn)錄,組蛋白修飾和核小體裝配以及細(xì)胞骨架的形成,主要依賴囊泡途徑調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo),從而在腫瘤的發(fā)展中起著重要作用。
　　 部分Ras超家族成員如RhoA,Racl,Rap1B已證實(shí)會(huì)被泛素化修飾,但是目前對(duì)Rab家族泛素

2、化調(diào)控方面的系統(tǒng)性研究還很少。
　　 本文將人源的Rab家族成員分別克隆連入帶有Flag標(biāo)簽的哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)載體中,測(cè)序鑒定并表達(dá)驗(yàn)證其正確性。至今己成功克隆出了62個(gè)Rab家族成員。同時(shí),系統(tǒng)篩選檢測(cè)了Rab家族成員的蛋白水平能否被Smurf1、Smurf2、Wwp2、Nedd4和Itch對(duì)這些C2-WW-HECT家族泛素連接酶成員影響,發(fā)現(xiàn)15個(gè)Rab家族成員的蛋白水平會(huì)C2-WW-HECT家族泛素連接酶的某些成員所調(diào)控。

3、
　　 此外,通過進(jìn)一步研究Smurf1對(duì)RabSa蛋白水平的調(diào)控與其E3泛素連接酶活性是否相關(guān)、蛋白酶體抑制劑對(duì)其降解的抑制作用、Smurf1與RabSa在細(xì)胞內(nèi)和體外條件下的相互作用以及體內(nèi)體外泛素化情況等方面,證實(shí)了Smurf1可以直接與Rab5a結(jié)合泛素化調(diào)控RabSa,并且這種調(diào)控和Smurf1的E3活性相關(guān)。這種泛素化調(diào)控在RabSa參與的受體內(nèi)化和非受體內(nèi)化的信號(hào)通路,細(xì)胞骨架的運(yùn)動(dòng)和腫瘤細(xì)胞的分化遷移等功能中的生