1、背景：
　　帕金森病(Parkinson's disease，PD)是一種常見的神經退行性疾病，以運動遲緩，肌強直和靜止性震顫為主要臨床特征。在帕金森患者腦內，死亡的神經細胞多是位于黒質區(qū)的多巴胺神經元且多在臨床癥狀之前出現，當有明顯臨床癥狀時，大約有70％多巴胺神經元可能已經死亡。帕金森病的病理特征是多巴胺神經元中α-synuclein(α-syn)包涵體的出現，該蛋白是路易小體(Lewybody)的主要成分。異常折疊聚集的α-

2、syn蛋白可形成低聚物，產生細胞毒性，是帕金森病致病的的主要病理過程。
　　Numb蛋白是一種進化保守的膜受體蛋白，在果蠅神經系統研究中發(fā)現其具有細胞命運決定子的作用。它具有多種蛋白質-蛋白質相互作用的區(qū)域，包括磷酸酪氨酸結合域(PTB)和羧基端結構域，PTB結構域可與泛素連接酶，如Siah1、Lnx等相互作用，對靶蛋白進行泛素化修飾。羧基端結構域包含一個EH結構域結合基序和α-銜接蛋白結合位點，可與相關靶蛋白結合，參與調控受體蛋

3、白胞內循環(huán)、胞內移行。Numb是一種內吞蛋白，參與神經突生長和細胞遷移過程。此外，Numb通過與Notch相互拮抗，參與調節(jié)多種生化信號途徑、調節(jié)粘附和緊密連接等諸多過程。有研究表明Numb/Notch信號通路通過調控泛素蛋白酶體系統，參與某些蛋白的泛素化調控。
　　關于Numb蛋白對α-syn蛋白寡泛素化水平的調控在國內外尚未見相關報道，本課題將深入探求Numb蛋白是否通過參與調控α-syn蛋白寡泛素化修飾模式，參與帕金森病的致

4、病過程。為帕金森病的早期診斷與治療提供新的思路和方法。
　　目的：
　　探索Numb蛋白對α-突觸核蛋白(α-synuclein，α-syn)寡泛素化水平的調控。
　　方法：
　　將EGFP-N1、EGFP-Numb分別與HA-α-syn轉染SH-SY5Y細胞;利用細胞免疫熒光法檢測α-syn蛋白和Numb蛋白的亞細胞共定位;利用免疫共沉淀的方法檢測Numb蛋白與α-syn蛋白的相互結合;利用Westernblo

5、t技術檢測Numb蛋白對α-syn蛋白寡泛素水平的調控;在MPP+細胞模型中利用細胞免疫熒光檢測Numb對α-syn包涵體形成的影響。
　　結果：
　　Numb與α-syn在細胞質中存在亞細胞共定位;
　　Numb蛋白上調α-syn寡泛素化水平;
　　Numb蛋白通過促使α-syn寡泛素水平上調誘導MPP+細胞模型中α-syn陽性包涵體形成。
　　結論：
　　Numb蛋白上調α-syn蛋白寡泛素水平并