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1、本文首先通過對(duì)紅曲霉菌株進(jìn)行紫外以及鈷60的復(fù)合誘變,確定了最佳的紫外照射時(shí)間為2.5min,鈷60的照射劑量為600Gy,使殼聚糖的生產(chǎn)能力提高了5.46%,且所篩選出的目的菌株性能穩(wěn)定。對(duì)誘變后的菌株進(jìn)行培養(yǎng)基的優(yōu)化。以玉米芯的酶解液做為發(fā)酵底物來進(jìn)行培養(yǎng),確定了最佳的氮源、無機(jī)鹽的含量,并由實(shí)驗(yàn)獲知在培養(yǎng)基中添加適量的Mg2+、生物素能明顯的提高菌絲體的生物量。經(jīng)試驗(yàn)紅曲霉發(fā)酵最佳培養(yǎng)基組分為:玉米芯酶水解液,2%蛋白胨,0.1%
2、MgSO4·7H2O,0.2%NaNO3,0.1%KH2PO4,1mg/L生物素。以此為基準(zhǔn)對(duì)紅曲霉的發(fā)酵工藝進(jìn)行研究,當(dāng)初始pH為6、接種量10%、溫度32℃、轉(zhuǎn)速220r/min、發(fā)酵周期為32h時(shí)效果最佳,同時(shí)經(jīng)實(shí)驗(yàn)探討了酸堿脫蛋白工藝條件、脫色工藝以及脫乙酰化工藝。確定較優(yōu)的紅曲霉提取殼聚糖工藝路線為:紅曲霉干燥菌體、磨碎、除蛋白(先用1NHCl、沸水浴、固液比1:6,處理3h,離心洗滌,再用5%NaOH溶液、沸水、固液比1:6
3、,處理3h,再用15%NaOH溶液處理1h)、離心、過濾洗滌(至中性)、脫色(NaClO,乙醇/NaNO3)、酸堿不溶物、干燥、脫乙酰化處理(50%NaOH,固液比1:4,處理溫度120℃,處理時(shí)間3h)、離心洗滌過濾、浸提、沉淀(pH調(diào)制9)、沉淀物、干燥、殼聚糖。探討了微波法脫乙酰化的工藝條件。本文還利用紅曲米生產(chǎn)紅曲紅的廢渣以及用提取紅曲紅后深層發(fā)酵紅曲霉菌絲體制備殼聚糖分別為2.16%,5.42%。最后利用Fenton試劑對(duì)生產(chǎn)
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