1、近年來，嗜鉻細胞瘤的分子遺傳學研究取得了重要進展。在家族性嗜鉻細胞瘤中，原癌基因RET(Rearranged during Transfection)點突變和抑癌基因VHL(vonHippel-Lindau)的失活可能分別為多內(nèi)分泌腺瘤病2型(multiple endocrineneoplasia type2，MEN2)和VHL病的致病因素，而單純家族性嗜鉻細胞瘤中RET和VHL基因的突變情況尚不明確。散發(fā)性嗜鉻細胞瘤發(fā)病的分子機制，可

2、能涉及原癌基因的激活、抑癌基因的缺失以及凋亡障礙和端粒酶活性增強等諸多因素。本研究旨在通過檢測原癌基因RET和抑癌基因VHL在家族性及散發(fā)性嗜鉻細胞瘤中的種系突變情況，探討二者在嗜鉻細胞瘤發(fā)生中的遺傳基因變化。 方法 1、 選取2000年至2006年間北京協(xié)和醫(yī)院經(jīng)手術(shù)和病理確診的嗜鉻細胞瘤患者57例，其中MEN-2A型5例，MEN-2B型1例，散發(fā)性嗜鉻細胞瘤51例。在散發(fā)性嗜鉻細胞瘤中，腎上腺嗜鉻細胞瘤29例，腎上

3、腺外副神經(jīng)節(jié)瘤22例；惡性嗜鉻細胞瘤21例，良性嗜鉻細胞瘤30例。正常健康受試者16例作為對照組。 2、 選取6個家族性嗜鉻細胞瘤家系，共29例受檢查者，其中包括11名患者，一級親屬13例，二級親屬2例，三級親屬3例(均以先證者為參照對象)。 3、 提取上述受試者外周血DNA，采用多聚酶鏈式反應(yīng)(polymerase chainreaction，PCR)技術(shù)對RET exons 10，11，13，14，15，16進行

4、擴增，PCR產(chǎn)物經(jīng)純化后直接測序，以明確其是否存在點突變。 結(jié)果 1、 在51例散發(fā)性嗜鉻細胞瘤患者中，4例(4／21，19.1％)惡性嗜鉻細胞瘤，4例(4／30，13.3％)良性嗜鉻細胞瘤發(fā)生RET基因第11外顯子的點突變(Gly691Ser)，總突變率為15.7％(8／51)。且惡性嗜鉻細胞瘤突變發(fā)生率高于良性嗜鉻細胞瘤，差異有統(tǒng)計學意義(P=0.036)。 2、 在51例散發(fā)性嗜鉻細胞瘤患者中未發(fā)現(xiàn)VH

5、L基因的點突變。 3、在6個家族性嗜鉻細胞瘤家系中，家系1的17例受檢者，分別檢出2例患者(2／2)、10例一級親屬(10／13)、1例二級親屬(1／2)發(fā)生RET、exon 11的點突變(Gly691Ser)；家系3中僅有1例患者檢出RET’exon 11的點突變(Gly691Ser)。在家族性嗜鉻細胞瘤11例患者中，有3例發(fā)生RET、基因的點突變，突變率為27.3％(3／11)。 4、 在6個家族性嗜鉻細胞瘤家系中

6、，家系4的2例受檢者中1例患者被發(fā)現(xiàn)有VHL eXon3點突變(712C→T，Arg→Trp)，另1例為一級親屬,未發(fā)現(xiàn)基因突變；家系6的3例患者發(fā)生VHL exorl3點突變(695G→A，Arg→Gln)，余3例為親屬，未發(fā)現(xiàn)基因突變。在家族性嗜鉻細胞瘤11例患者中，VHL基因的點突變率為45.5％(5／11)。 結(jié)論 1、散發(fā)性嗜鉻細胞瘤中，RET基因的點突變率為15.7％，其中惡性嗜鉻細胞瘤高于良性嗜鉻細胞瘤；未