1、肺動脈高壓(PAH)是指以肺動脈壓、肺血管阻力進行性增高，終末期導致患者右心衰竭及死亡為特征的一種疾病。肺動脈高壓通過復雜的病理機制，導致患者在肺組織結構、分子信號途徑和基因表達等多個方面均發(fā)生了異常。目前研究發(fā)現(xiàn)，肺動脈高壓是在炎癥、異常血流剪切力、缺氧等因素的誘發(fā)下，細胞因子及血管活性物質異常產生，并作用于血管平滑肌細胞、血管內皮等靶細胞，導致肺血管異常收縮、生長和重構、細胞外基質堆積等一系列后果，最終形成肺動脈高壓，其中肺血管重構

2、是肺動脈高壓主要的病理學特征。
　　研究表明，細胞的異常增殖，凋亡減少是組織構型重建的重要原因之一。凋亡是有核細胞在某些生理或病理情況下，基因特定程序被啟動，通過DNA內切酶發(fā)生有序的主動性非炎癥性死亡，又稱細胞程序性死亡。細胞凋亡和增殖是矛盾的兩個對立面，它們之間的平衡維持著機體組織結構的正常狀態(tài)和生理功能。越來越多的研究證明，肺動脈平滑肌細胞增殖增加和/或凋亡減少都可促進肺血管中膜肥厚和血管構型重建，是肺動脈高壓發(fā)病的一個重要

3、機制。正常情況下，血管壁結構是相對穩(wěn)定的，由相應細胞的增殖和凋亡共同協(xié)調維持，當血管壁在各種內因和外因（如細胞因子、缺氧、血流剪切力等）的刺激作用下，肺動脈平滑肌細胞經過一系列信號轉導過程，啟動內部增殖基因和/或凋亡抑制基因的表達，導致肺動脈平滑肌細胞的增殖增多和/或凋亡減少，促使肺動脈平滑肌細胞增殖、肥大、遷移，最終引起肺血管壁增厚和肺血管重構。目前，很多學者把抗肺血管重構的目光轉移到促進肺動脈平滑肌細胞凋亡這個靶點上，促進肺動脈平滑

4、肌細胞凋亡可能成為未來治療肺動脈高壓的突破口。
　　5-羥色胺轉運體（5-HTT）是一種膜蛋白，表達于神經元、血小板、肺動脈平滑肌細胞等體細胞中，主要功能是將5-羥色胺(5-HT)轉運至細胞內部發(fā)揮生物學效應。5-羥色胺可經細胞膜上的5-羥色胺轉運體介導進入肺動脈平滑肌細胞，并通過多條促增殖信號轉導途徑引起肺動脈平滑肌細胞增殖肥大，導致肺血管構型重建。研究結果表明5-羥色胺轉運體在許多類型的肺動脈高壓發(fā)病機制中起重要作用，但在左向

5、右分流型肺動脈高壓中，是否也存在5-HTT的高表達，它與肺動脈平滑肌細胞凋亡狀況有無關系，目前尚未見相關報導。
　　他汀類藥物是一種3-羥基，3-甲基戊二酰輔酶A(HMG-CoA)還原酶抑制劑，它所具有的降脂、穩(wěn)定粥樣斑塊、改善內皮細胞功能、抑制血小板聚集、抗炎抗氧化、免疫調節(jié)等作用使其廣泛應用于心腦血管疾病等領域。近來，越來越多的學者開始關注他汀類藥物的“非調脂作用”，國內外有研究發(fā)現(xiàn)他汀類藥物可通過與肺動脈高壓發(fā)生的各個環(huán)節(jié)產

6、生作用，降低肺動脈壓力，緩解肺血管過度收縮，抑制肺血管重建，他汀類藥物的這些作用可能與誘導肺動脈平滑肌細胞或血管內皮細胞凋亡有關，用于治療和預防肺動脈高壓有相當廣闊的前景。瑞舒伐他汀(rosuvastatin)是一種新型羥甲基戊二酰輔酶A(HMG-CoA)還原酶抑制劑，是他汀類藥物家族的新成員，其在肺動脈高壓中的作用及機制報導甚少，更未見其對高肺血流性肺動脈高壓影響的研究。
　　在本研究中，我們用腹腔分流法建立左向右分流大鼠肺動脈

7、高壓模型，通過觀察模型大鼠肺動脈平滑肌細胞5-HTT的表達情況及肺動脈平滑肌細胞凋亡情況，了解大鼠肺高血流肺動脈高壓的發(fā)生是否與這些因素有關，初步探討肺高血流肺動脈高壓可能的發(fā)病機制。同時，我們通過瑞舒伐他汀來干預肺高血流肺動脈高壓大鼠模型，以觀察瑞舒伐他汀是否對肺高血流大鼠肺組織中5-HTT的表達及肺動脈平滑肌細胞的凋亡產生影響，初步探討瑞舒伐他汀在肺高血流模型大鼠肺血管重構中的作用機制。
　　方法:
　　1.將40只SD

8、大鼠隨機分為4組:①分流11周組、②分流8周組、③分流4周組、④對照組，每組各10只。分流11周組、分流8周組和分流4周組采用腹主動脈，下腔靜脈分流法建立左向右分流大鼠模型，而對照組開腹但不建立分流。
　　2.在相應時間內處死大鼠，處死前測量大鼠肺動脈平均壓(mPAP)，處死后對大鼠右心室和左心室+室間隔進行稱重，計算右心室肥厚指數(shù)(RVI)。
　　3.常規(guī)石蠟包埋大鼠肺組織，切片并HE染色，觀察各組大鼠肺組織小動脈的形態(tài)變

9、化，計算管壁厚度占外徑的百分比(WT％)及管壁面積占血管總面積的百分比(WA％)以此作為反映大鼠肺組織血管重構程度的指標。
　　4.用免疫組化SP法（鏈霉卵白素-過氧化物酶法）檢測大鼠肺組織中5-HTT的表達情況。
　　5.用原位末端標記法（TUNEL法）檢測大鼠肺動脈平滑肌細胞凋亡情況并計算TUNEL陽性細胞百分比(AI值)。
　　6.用Western Blot法檢測各組大鼠肺組織中5-HTT，bcl-2蛋白的水平。

10、
　　7.用RT-PCR檢測各組大鼠肺組織中5-HTTmRNA的表達情況。
　　8.在上述實驗的基礎上，另將30只SD大鼠隨機分為3組（每組10只）:①分流組;②分流給藥組:分流手術后第二天開始給予瑞舒伐他汀(10 mg/kg)灌胃，每日1次，連續(xù)11周;③對照組。觀察瑞舒伐他汀對高肺血流肺動脈高壓模型大鼠肺組織中5-HTT、bcl-2蛋白表達(Western Blot法)及肺動脈平滑肌細胞凋亡(TUNEL法)的影響。

11、>　　9.所得數(shù)據(jù)采用SPSS13.0軟件進行統(tǒng)計學分析，所有數(shù)據(jù)以mean士SD表示，兩組間比較采用成組t檢驗，多組間比較采用單因素方差分析，p＜0.05時認為差異具有統(tǒng)計學意義。
　　結果：
　　1.隨著分流時間的延長，分流各組大鼠平均肺動脈壓、右心室肥厚指數(shù)(RVI)逐步升高，第11周模型大鼠出現(xiàn)明顯肺動脈壓力升高和右心室肥厚的表現(xiàn)，與其他各組間上述指標的差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。
　　2.隨著分流時間的

12、延長，分流各組大鼠肺組織血管壁明顯增厚，出現(xiàn)肺動脈平滑肌細胞肥大、增生、管腔狹窄，模型大鼠出現(xiàn)了明顯的肺血管構型重建。同時，各分流組肺小動脈管壁厚度占血管外徑百分比(WT％)、肺小動脈管壁面積占血管總面積百分比(WA％)也逐步升高，各組之間WT％、WA％值的差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。
　　3.免疫組化結果顯示隨著分流時間的延長，各組大鼠肺組織中5-HTT的表達呈逐步升高的趨勢，各組之間的差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。<

13、br>　　4.原位末端標記法檢測結果提示各組大鼠肺組織內均存在一定比例的凋亡肺動脈平滑肌細胞。隨著分流時間的延長，大鼠肺動脈平滑肌凋亡細胞逐步減少，凋亡指數(shù)(AI)也逐步下降。統(tǒng)計學分析顯示各組間均有顯著性差異(P＜0.05)。
　　5.Western Blot法檢測結果提示隨著分流時間的延長，各組大鼠肺組織中5-HTT蛋白、bcl-2蛋白的水平呈逐步升高的趨勢，分流11周組與其他各組間指標的差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。

14、r>　　6.RT-PCR檢測結果提示隨著分流時間的延長，各組大鼠肺組織中5-HTTmRNA表達水平呈逐步升高的趨勢，其中分流11周組最為明顯，與其他各組之間的差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。
　　7.隨著分流時間的延長，各組大鼠肺組織中5-HTT水平逐步升高，而凋亡指數(shù)(AI)逐步下降，相關性分析提示5-HTT水平與AI值之間呈明顯負相關關系(P＜0.05)。
　　8.瑞舒伐他汀干預組大鼠肺組織中5-HTT、bcl-2蛋白

15、水平較分流組明顯降低，而干預組大鼠肺動脈平滑肌TUNEL陽性細胞百分比較分流組明顯升高，統(tǒng)計分析顯示兩組間差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。
　　結論:
　　1.腹腔分流法能使模型大鼠出現(xiàn)肺動脈壓明顯升高、右心室肥厚、肺血管構型重建等肺動脈高壓的病理改變。
　　2.左向右分流大鼠肺高壓模型中存在著分流時間依賴的5-HTT、bcl-2蛋白高表達，而肺動脈平滑肌凋亡細胞百分比卻低于正常水平，5-HTT介導的5-HT信號通路