1、目的：通過檢測miR-185和其預測靶基因HMGA2、CCNE1在人支氣管上皮細胞及肺腺癌細胞中表達情況分析二者之間相關性。MTT法和Transwell小室測定人支氣管上皮細胞及肺癌細胞的增殖活性和遷徙能力，研究miR-185對于肺癌細胞遷徙、增殖能力的影響。
　　方法：培養(yǎng)人支氣管上皮細胞16HBE及肺腺癌細胞 A549、LTEP-a-2、NCI-H1975、NCI-H1650，應用實時熒光定量PCR檢測人支氣管上皮細胞及4種肺

2、腺癌細胞的miR-185的表達情況以及miR-185的預測靶基因HMGA2、CCNE1 mRNA在細胞中的表達水平,分析miR-185和HMGA2、CCNE1 mRNA相關性。采用western blot檢測人支氣管上皮細胞及4種肺腺癌細胞中的HMGA2蛋白、CCNE1蛋白的表達。分析miR-185和HMGA2、CCNE1基因表達相關性。MTT法和Transwell小室比較人支氣管上皮細胞及肺癌細胞的增殖遷徙能力差異，分析 miR-18

3、5對于肺癌細胞遷徙、增殖能力的影響。
　　結果：MiR-185在4株肺腺癌細胞系A549、LTEP-a-2、NCI-H1975、NCI-H1650的相對表達均低于人支氣管上皮細胞16HBE，差異有顯著性(F=286.476,P<0.05)。HMGA2 mRNA在4株肺腺癌細胞系中表達水平明顯高于16HBE，差異有顯著性(F=184.238,P<0.05)。HMGA2 mRNA在16HBE、LTEP-a-2、NCI-H1650、NC

4、I-H1975、A549中的表達水平是逐漸升高的。Pearson相關性分析發(fā)現(xiàn)人支氣管上皮細胞和肺腺癌細胞 miR-185的表達水平與 HMGA2 mRNA表達水平之間呈負相關（r=-0.976,P<0.01）。CCNE1mRNA在4株肺腺癌細胞中表達水平明顯高于16HBE，差異有顯著性(F=1959.754,P<0.05)。CCNE1mRNA在16HBE、LTEP-a-2、NCI-H1650、NCI-H1975、A549中的表達是逐漸

5、升高的。Pearson相關性分析發(fā)現(xiàn)人支氣管上皮細胞及肺腺癌細胞中miR-185的表達水平與CCNE1 mRNA的含量之間存在負相關（r=-0.945，P<0.05）。Western blot結果顯示HMGA2蛋白在人支氣管上皮細胞中是不表達的，但是在4株肺腺癌細胞中均表達，差異有顯著性（F=46.135，P<0.05）。CCNE1蛋白在肺腺癌細胞中的表達均高于人支氣管上皮細胞，差異有顯著性（F=253.631，P<0.05）。MTT實

6、驗顯示人支氣管上皮細胞及肺腺癌細胞的增殖能力有差異，差異具有顯著性。Transwell小室結果顯示人支氣管上皮細胞及肺腺癌細胞的遷徙能力是有差別的，差異具有顯著性。在肺腺癌細胞株miR-185的表達下降，其增殖和遷徙能力呈增強趨勢，二者具有相關性。
　　結論：在肺腺癌中存在miRNA-185表達水平降低和HMGA2和CCNE1表達增高，二者之間有負相關性。肺腺癌細胞株，其增殖和遷徙能力增強，miR-185的表達下降，二者具有負相關