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![乳酸菌胞外多糖的分離純化及其生物活性研究.pdf_第1頁](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/16/16/77b78f48-ea32-4bce-a72c-c56ce590b8ca/77b78f48-ea32-4bce-a72c-c56ce590b8ca1.gif)
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文檔簡介
1、本論文優(yōu)化了乳酸乳球菌乳亞種產(chǎn)胞外多糖(Exopolysaccharide,EPS)的培養(yǎng)條件,結(jié)果表明:在選擇BLX 培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上,改進(jìn)培養(yǎng)基的成分(1L 培養(yǎng)基):葡萄糖10.0g,果糖10.0g,蛋白胨12.5g,胰蛋白胨12.5g;最佳發(fā)酵條件:
溫度35℃,初始pH 值為6.0,接種量3.0%(V/V),時間為24h。根據(jù)優(yōu)化的培養(yǎng)條件,胞外多糖的產(chǎn)量可達(dá)到950.488mg/L。
采用內(nèi)壓式中空
2、纖維膜超濾裝置對乳酸乳球菌乳亞種發(fā)酵液中胞外多糖進(jìn)行超濾濃縮分離。結(jié)果表明:在操作壓力0.08MPa,操作溫度25℃的條件下,用分子量為50ku的膜超濾經(jīng)離心除菌的發(fā)酵液,發(fā)酵液的體積濃縮了5.04倍,而胞外多糖的含量從949.54mg/L 上升到4790mg/L。
對乳酸乳球菌胞外多糖的提取和粗胞外多糖中蛋白質(zhì)的去除及脫色進(jìn)行了研究,選擇DA201-C 樹脂對胞外多糖溶液進(jìn)行脫色,TCA 除蛋白,再經(jīng)過濃縮、透析、DEA
3、E-纖維素離子交換柱層析和Sepharose CL-6B 凝膠柱層析使多糖得到純化,最后得到純化樣品EPS2。
紅外光譜掃描分析了胞外多糖的結(jié)構(gòu),發(fā)現(xiàn)分離純化出來的EPS2 具有β糖苷鍵的特征吸收峰(908 cm-1);將標(biāo)準(zhǔn)葡聚糖系列進(jìn)行柱層析得到其洗脫體積,以LgMW 對保留時間TR(Retention Time)進(jìn)行線性回歸,得到EPS2的分子量約為6.9×105;TLC 分析EPS2的單糖組成主要為果糖和鼠李糖;另
4、外還研究了胞外多糖的抑菌作用,胞外多糖對枯草桿菌的抑菌效果顯著,對大腸桿菌的抑菌效果不是很明顯。
通過動物實(shí)驗(yàn),檢測小鼠血清和肝組織中的過氧化氫酶(catalase,CAT)活力、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量、超氧化物歧化酶(super oxide dismutase,SOD)活力可知,灌胃胞外多糖組的小鼠與對照組小鼠相比,抗氧化能力顯著提高。
研究了胞外多糖對由環(huán)磷酰胺引起免疫損傷的
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