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1、通過(guò)菌落拉絲法篩選得到產(chǎn)活性胞外多糖的干酪乳桿菌LC2W,并通過(guò)菌種鑒定;優(yōu)化了干酪乳桿菌LC2W豐產(chǎn)胞外多糖的營(yíng)養(yǎng)條件和培養(yǎng)條件;干酪乳桿菌LC2W發(fā)酵液除蛋白和菌體后乙醇沉淀得粗多糖LCP,得率153.4 mg/L,粗多糖通過(guò)離子交換柱分級(jí)純化得到三個(gè)組分LCP1、LCP2和LCP3,分別占LCP質(zhì)量的35.74%,12.61%和33.34%,總回收率為81.7%。結(jié)合紅外圖譜和其化學(xué)組成分析確定LCP1和LCP2是兩種中性多糖,L
2、CP3為一種蛋白質(zhì)-多糖復(fù)合物,其中蛋白質(zhì)含量約為60%。
動(dòng)物實(shí)驗(yàn)顯示胞外多糖LCP1能顯著降低SHR的動(dòng)脈收縮壓,最大降壓幅度出現(xiàn)在給藥后2~4h。體外淋巴細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)顯示,LCP1、LCP2和LCP3均無(wú)細(xì)胞毒性,且均能顯著抑制T/B淋巴細(xì)胞的增殖反應(yīng),顯示較強(qiáng)的免疫抑制活性。
高效凝膠色譜測(cè)定LCP1重均分子量Mw為1.236×106Da、固有粘度[T1]為1.875 dL/g、多分散性指數(shù)Pd為1.
3、202和Mark-Houwink指數(shù)為0.654,Mark-Houwink指數(shù)表明LCP1在0.1 mol/L的NaNO3溶液中呈無(wú)規(guī)卷曲構(gòu)象。動(dòng)態(tài)激光光散射研究表明LCP1在0.1mol/L NaNO3溶液中幾乎不發(fā)生聚集,靜態(tài)激光光散射測(cè)得LCP1在0.1 mol/L的NaNO3溶液中的重均分子量Mw為1.276×106 Da,、回旋半徑Rg為52.9 nm、第二維里系數(shù)A2為2.44×10-4 cm3mol/g2;動(dòng)態(tài)激光光散射測(cè)
4、定LCP1水力半徑Rh為34.8 nm,ρ值(Re/Rh)為1.61表明LCP1分子在溶液中呈無(wú)規(guī)卷曲的構(gòu)象。
通過(guò)對(duì)LCP1溶液流變性質(zhì)研究發(fā)現(xiàn),高濃度LCP1溶液呈剪切變稀,低濃度時(shí),剪切速率對(duì)粘度沒(méi)有影響,溶液粘度隨溫度升高下降明顯,pH對(duì)LCP1溶液粘度影響很小,通過(guò)粘彈性研究發(fā)現(xiàn)LCP1溶液不能形成膠體。
離子色譜測(cè)定LCP1由鼠李糖、葡萄糖和半乳糖組成,摩爾比約為3:5:2。通過(guò)甲基化分析和部分酸
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