1、目的:
　　 研究重組人促紅細(xì)胞生成素預(yù)處理對(duì)缺血性急性腎衰竭的保護(hù)作用并探討其可能的作用機(jī)制。
　　 方法:
　　 通過(guò)缺血再灌注損傷法建立在體大鼠缺血性急性腎衰竭模型,雄性成年SD大鼠48只隨機(jī)分為4組,每組12只,缺血前及再灌注后各6只。假手術(shù)組大鼠單純切除右腎,未行左腎缺血再灌注；缺血組大鼠行右腎切除,左腎缺血45 min再灌注24 h；促紅素組大鼠亦單純切除右腎,于術(shù)前24 h腹腔注射重組人促紅細(xì)胞生成

2、素3000U/kg,但未行左腎缺血再灌注；促紅素缺血組大鼠于缺血前24 h腹腔注射重組人促紅細(xì)胞生成素3000U/kg,行右腎切除,左腎缺血45 min再灌注24 h。假手術(shù)組及缺血組分別于術(shù)前24 h以生理鹽水1.5 ml/kg腹腔注射。分別于缺血前及再灌注后測(cè)定血肌酐和尿素氮值,用HE染色及paller法腎小管評(píng)分觀察腎組織損傷形態(tài)學(xué)改變,采用TUNEL法檢測(cè)腎小管上皮細(xì)胞凋亡。分別于大鼠腎缺血前、缺血再灌注后取腎組織標(biāo)本,采用We

3、stern blot法半定量分析促紅細(xì)胞生成素對(duì)缺血性急性腎衰竭大鼠腎組織中抗凋亡因子Bcl-2及半胱天冬蛋白酶Caspase-3的蛋白表達(dá)的影響。
　　 結(jié)果:
　　 腎功能結(jié)果:與假手術(shù)組(Scr52.38±6.68,BUN4.71±0.93)比較,再灌注后缺血組(Scr353.20±34.34,BUN41.25±4.10)、促紅素缺血組(Scr251.80±37.66,BUN25.67±3.10)血肌酐、尿素氮明顯

4、升高(P<0.05)；與缺血組(Scr353.20±34.34,BUN41.25±4.10)比較,促紅素缺血組(Scr251.80±37.66,BUN25.67±3.10)血肌酐、尿素氮水平下降(P<0.05)。缺血前各組血肌酐、尿素氮差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 腎組織形態(tài)學(xué)結(jié)果:與假手術(shù)組(19.33±3.33)比較,缺血組(250.67±23.96)及促紅素缺血組(135.33±11.69)腎小管損傷明顯、腎小管paller評(píng)

5、分升高(P<0.05)；與缺血組(250.67±23.96)比較,促紅素缺血組(135.33±11.69)腎小管損傷減輕、腎小管paller評(píng)分下降(P<0.05)。
　　 TUNEL染色結(jié)果:與假手術(shù)組[(1.17±0.48)％]比較,缺血組[(24.58±4.39)％]及促紅素缺血組[(8.52±2.06)％]TUNEL凋亡指數(shù)增加(P<0.05)；與缺血組[(24.58±4.39)％]比較,促紅素缺血組[(8.52±2.0

6、6)％]TUNEL凋亡指數(shù)下降(P<0.05)。
　　 缺血前各組Western blot結(jié)果:與假手術(shù)組(55.17±7.76)比較,促紅素組(135.00±9.89)及促紅素缺血組(133.05±8.78)Bcl-2蛋白表達(dá)上調(diào)(P<0.05),各組Caspase-3蛋白表達(dá)在缺血前差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 再灌注后各組Western blot結(jié)果:與假手術(shù)組(Bcl-2,52.93±7.13,Caspase-3,1

7、8.53±1.86)比較,缺血組(28.12±6.49)Bcl-2蛋白表達(dá)下調(diào)(P<0.05),促紅素組(133.08±8.92)、促紅素缺血組(86.00±7.99)Bcl-2蛋白表達(dá)上調(diào)(P<0.05),缺血組(55.62±2.90)、促紅素缺血組(45.77±2.08)Caspase-3蛋白表達(dá)上調(diào)(P<0.05)；與缺血組(Bcl-2,28.12±k6.49,Caspase-3,55.62±2.90)比較,促紅素缺血組Bcl-2

8、蛋白(86.00±7.99)表達(dá)上調(diào),Caspase-3蛋白(45.77±2.08)表達(dá)下調(diào)(P<0.05)。
　　 各組缺血前與再灌注后Western blot結(jié)果:與缺血前比較,缺血組、促紅素缺血組缺血再灌注后Bel-2蛋白表達(dá)下調(diào)(P<0.05),假手術(shù)組、促紅素組缺血再灌注前后Bcl-2蛋白表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；缺血組、促紅素缺血組再灌注后Caspase-3蛋白表達(dá)上調(diào)(P<0.05),假手術(shù)組、促紅素組缺血再灌注前后C