1、槲皮素（quercetin,3，5,7,3',4'—pentahydroxy flavone）是在植物界中大量存在的一種黃酮類(lèi)化合物，約有100多種植物含有槲皮素。其具有廣泛的藥理作用和生物活性，如抗氧化和清除氧自由基、降低血壓、保護(hù)心肌缺血、避免缺血再灌注損傷、增強(qiáng)免疫功能及抗癌、抗菌、抗病毒及鎮(zhèn)痛作用等，但該化合物含有五個(gè)極性較大的羥基基團(tuán)，親酯性與親水性都較弱，存在強(qiáng)烈的首過(guò)效應(yīng)，生物利用度極低，在臨床治療方面應(yīng)用局限性強(qiáng)。因此本

2、論文以槲皮素為先導(dǎo)化合物，根據(jù)羥基的化學(xué)性質(zhì)差異，對(duì)其進(jìn)行化學(xué)修飾，并研究了合成的槲皮素衍生物對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞在氧脅迫下的預(yù)防與保護(hù)作用。
　　 從改善槲皮素的溶解性、阻斷其首過(guò)效應(yīng)出發(fā)，本論文選擇溴乙酸乙酯以及氯乙酸乙酯對(duì)槲皮素進(jìn)行酯化修飾，合成了不同取代數(shù)的衍生物。利用相位移催化法進(jìn)一步合成了三種相對(duì)應(yīng)的羧酸衍生物，并優(yōu)化了其合成的反應(yīng)條件。以氯乙酸乙酯為反應(yīng)原料，DMF為溶劑，NaHCO3為縛酸劑，30℃下恒溫?cái)嚢?h得

3、到了槲皮素衍生物Eaq1。以溴乙酸乙酯為反應(yīng)原料，DMF為溶劑，K2CO3為縛酸劑，30℃下恒溫?cái)嚢?h得到衍生物Eaq3，Eaq4。再以純化后的Eaq1，Eaq2，Eaq4為反應(yīng)原料，以相位轉(zhuǎn)移催化法合成了衍生物Aq1，Aq3，Aq4。所有合成的化合物都采用IR，MS，13C NMR進(jìn)行了結(jié)構(gòu)鑒定與表征。
　　 采用H2O2誘導(dǎo)建立人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)氧化損傷模型。將細(xì)胞分為對(duì)照組、H2O2損傷組和藥物組。測(cè)定了HU

4、VEC的乳酸脫氫酶的釋放率、超氧化物歧化酶、丙二醛(MDA)、NO生成量的變化趨勢(shì);通過(guò)MTT、激光共聚焦、評(píng)估了正常和氧化損傷HUVEC的存活率、細(xì)胞形態(tài);運(yùn)用高效液相色譜法快速測(cè)定藥物分子在細(xì)胞內(nèi)的吸收和代謝，并與槲皮素進(jìn)行對(duì)比。主要結(jié)果如下:
　　 1.采用100μmol/L H2O2誘導(dǎo)建立了血管內(nèi)皮細(xì)胞氧化損傷模型，激光共聚焦顯微鏡觀察的結(jié)果表明，細(xì)胞形態(tài)發(fā)生了明顯改變，產(chǎn)生了凋亡小體。
　　 2.當(dāng)槲皮素及合

5、成的衍生物終濃度達(dá)到150μmol/L時(shí)，會(huì)抑制內(nèi)皮細(xì)胞的存活，細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯改變，呈現(xiàn)細(xì)胞毒性。
　　 3.槲皮素及合成的衍生物均能修復(fù)或者削弱H2O2對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生的損傷，能使血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷的LDH釋放率降低，增強(qiáng)SOD活力，增大NO的產(chǎn)率，使細(xì)胞的清除自由基的能力上升，進(jìn)而使細(xì)胞的脂質(zhì)代謝產(chǎn)物MDA的含量減少。
　　 4.采用HPLC測(cè)定細(xì)胞培養(yǎng)液所含槲皮素及其衍生物的濃度。結(jié)果表明，隨著與細(xì)胞共同孵育時(shí)