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1、目的:通過(guò)體外、體內(nèi)實(shí)驗(yàn),研究亞硒酸鈉(NaSeO2)單獨(dú)及與磷酸鈉(Na3PO4)聯(lián)合應(yīng)用對(duì)砷中毒的保護(hù)作用及其機(jī)制,為硒在砷中毒防治方面提供新的思路。
方法:(1)體外實(shí)驗(yàn):采用小鼠肝細(xì)胞原代培養(yǎng)技術(shù),用一定濃度的亞砷酸鈉(NaAsO2)處理小鼠肝細(xì)胞,同時(shí)分別加入不同劑量的亞硒酸鈉、磷酸鈉,通過(guò)噻唑藍(lán)還原法(MTT),測(cè)定各組細(xì)胞吸光度值(OD),分析亞硒酸鈉單獨(dú)及與磷酸鈉聯(lián)合應(yīng)用時(shí)對(duì)砷染毒小鼠肝細(xì)胞增殖的影響。(2
2、)體內(nèi)實(shí)驗(yàn):SPF級(jí)昆明種(KM)小鼠70只,按體重隨機(jī)分為7組:正常對(duì)照組、亞砷酸鈉模型組、亞硒酸鈉對(duì)照組、磷酸鈉對(duì)照組、亞硒酸鈉干預(yù)組、磷酸鈉干預(yù)組、亞硒酸鈉+磷酸鈉干預(yù)組共7組。分別給以不同濃度的亞硒酸鈉、磷酸鈉進(jìn)行干預(yù),于60d結(jié)束實(shí)驗(yàn)并取材,采用黃嘌呤氧化酶法檢測(cè)超氧化物歧化酶活性(SOD)、硫代巴比妥法檢測(cè)丙二醛(MDA)含量、紫外分光法檢測(cè)髓過(guò)氧化物酶(MPO)含量;高效液相色譜-氫化物發(fā)生原子熒光光譜法(HPLC-HGA
3、FS)測(cè)定KM小鼠肝、腎組織中MMA(一甲砷酸)和DMA(二甲砷酸)含量。
結(jié)果:(1)體外實(shí)驗(yàn):低、中劑量(3 mol/L、5 mol/L、10 mol/L)的亞硒酸鈉組OD值明顯高于亞砷酸鈉模型組(P<0.05);亞硒酸鈉(3 mol/L)+磷酸鈉(7.5 mol/L)干預(yù)組OD值明顯高于其它干預(yù)組(P<0.05)(2)體內(nèi)試驗(yàn):亞砷酸鈉模型組小鼠體重減輕,臟器系數(shù)升高,肝、腎中SOD、MPO含量低于正常對(duì)照組,MDA
4、含量高于正常對(duì)照組(P<0.05);亞硒酸鈉干預(yù)組體重明顯高于亞砷酸鈉模型組(P<0.05),臟器系數(shù)高于亞砷酸鈉模型組(P<0.05),肝、腎中SOD、MPO含量明顯高于亞砷酸鈉模型組(P<0.05),MDA含量低于亞砷酸鈉模型組(P<0.05);亞硒酸鈉+磷酸鈉干預(yù)組體重高于亞砷酸鈉模型組(P<0.05),臟器系數(shù)低于亞砷酸鈉模型組(P<0.05),小鼠肝、腎中DMA、MMA較砷模型組降低(P<0.05)。亞硒酸鈉干預(yù)組SOD活性、
5、MPO、MDA、DMA、MMA含量與亞硒酸鈉+磷酸鈉干預(yù)組含量未見(jiàn)差異(P>0.05)。
結(jié)論:(1)亞硒酸鈉低劑量(3 mol/L)對(duì)砷染毒小鼠肝細(xì)胞增殖有促進(jìn)作用,而亞硒酸鈉高劑量(25 mol/L)對(duì)砷染毒小鼠肝細(xì)胞增殖無(wú)促進(jìn)作用,未見(jiàn)磷酸鈉對(duì)亞硒酸鈉促進(jìn)砷染毒小鼠肝細(xì)胞增殖有協(xié)同作用。(2)亞硒酸鈉對(duì)亞砷酸鈉造成小鼠肝、腎的脂質(zhì)過(guò)氧化損傷具有明顯的保護(hù)作用,未見(jiàn)磷酸鈉與亞硒酸鈉聯(lián)合應(yīng)用對(duì)砷造成小鼠肝、腎的脂質(zhì)過(guò)氧化
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