1、目的：復制慢性砷中毒大鼠模型,研究CCK對慢性砷中毒大鼠初級感覺傳入的影響作用,初步探討其作用機制,為臨床慢性砷中毒的機制研究提供實驗依據(jù),并尋求治療慢性砷中毒的有效藥物。 方法： 1、創(chuàng)建胎鼠背根神經節(jié)神經元的培養(yǎng)方法,并進行神經元特異性的染色鑒定。 2、復制慢性砷中毒模型,行為學檢測模型復制成功后讓其受孕,培養(yǎng)孕16-18 d的胎鼠的DRG神經元,培養(yǎng)前用CCK進行預處理,觀察CCK對培養(yǎng)DRG神經元生長時間

2、的影響。 3、免疫組織化學檢測CCK在砷中毒大鼠背根神經節(jié)的表達,并檢測CCK陽性表達光密度半定量均值。 4、電生理學技術測定不同程度砷中毒大鼠坐骨神經復合動作電位和傳導速度,給予CCK孵育后觀察CCK對砷中毒大鼠坐骨神經復合動作電位和傳導速度的影響。 結果： 1、培養(yǎng)出了DRG神經元細胞,神經元特異性烯醇化酶(NSE)染色鑒定細胞陽性。 2、CCK預處理后,LD組DRG神經元細胞的存活時間平均從

3、原來的154±3 h延長到186±4h,MD組DRG神經元細胞的存活時間平均從原來的79±4 h延長到114±2 h。CCK對HD組神經元細胞存活時間的影響無顯著性差異。 3、CCK在慢性砷中毒大鼠背根神經節(jié)上的表達與正常對照組相比有所增強。NC組、LD組、MD組和HD組測得CCK表達陽性細胞的半定量光密度均值分別是0.163±0.002、0.196±0.003、0.274±0.011、0.201±0.004,以MD組反應陽性細

4、胞的半定量光密度均值最高。 4、和對照組相比,隨著砷中毒程度的增加,三個實驗組動作電位的幅值及傳導速度呈下降趨勢。LD組和MD組應用CCK以后,動作電位的幅值及傳導速度有所恢復,但HD組在應用CCK后,動作電位的幅值及傳導速度幾乎沒有影響。 結論： 1、慢性砷中毒胎鼠DRG神經元與對照組DRG神經元相比存活時間有所縮短。 2、CCK可使慢性輕、中度砷中毒胎鼠的DRG神經元的存活時間延長,對神經元起到一定的