1、中藥葛根是多年生豆科葛屬植物的干燥根塊,為我國常用的傳統(tǒng)藥食兩用植物。葛根中富含異黃酮類化合物、優(yōu)質淀粉,還含有人體必需氨基酸和硒、鋅、錳、鍺等多種微量元素,其中最主要的有效成分是葛根異黃酮。葛根具有擴張冠狀動脈和腦血管,降低心肌耗氧量,改善心腦血液循環(huán),增強機體免疫力,降低血糖含量等多種藥用功能。目前主要用于高血壓、糖尿病及心腦血管疾病的治療,異黃酮葛根素是治療心腦血管疾病的代表藥物之一?；诟鸶卺t(yī)藥、食品和化妝品當中的藥用價值,對

2、葛根活性成分進行提制分析及對抗氧化活性成分進行篩選,并對其與生物大分子DNA的作用方式進行研究具有重要意義。本研究主要從以下三個方面開展工作:
　　 (1)葛根中葛根素的提制分析
　　 以野葛根為研究對象,研究微波酸水解法提取葛根中的葛根素(puerarin),并將所擬提取方法同超聲酸水解、微波輔助萃取、冷凝回流提取及室溫冷浸4種方法進行對比。通過單因素實驗及正交實驗對微波酸水解提取條件進行優(yōu)化,以葛根素得率為指標,考察

3、鹽酸濃度、乙醇濃度、萃取溫度和萃取時間等因素對實驗結果的影響。采用HPLC-UV分析方法檢測葛根素的含量。實驗采用C18(日本島津15 mm×4.6 mm,5μm)色譜柱,甲醇:0.4％冰乙酸=40:60(v/v)為流動相,流速為0.8 mL/min,檢測波長為254 nm,進樣體積為10μL。實驗結果表明,各因素對葛根素提取率影響的主次順序為:鹽酸濃度>萃取溫度>乙醇濃度>萃取時間。最佳提取工藝條件為:鹽酸濃度0.4 mol/L,乙醇

4、濃度80％,萃取溫度60℃,萃取時間3 min。葛根素測定線性回歸方程為Y=2.22×107X-456131.5(r=0.9994),加標回收率在96.3％～103.6％之間,RSD為3.2％。所擬方法具有良好的精密度和重現(xiàn)性。用所擬方法進行實際樣品分析,結果滿意。
　　 (2)葛根中抗氧化活性成分的篩選和鑒定
　　 從天然產(chǎn)物,尤其是從具有臨床應用基礎的傳統(tǒng)植物藥中尋找安全、低毒、高效的天然抗氧化劑具有重要意義。本研究

5、以葛根總異黃酮為原料,通過其對DPPH自由基的清除作用,結合HPLC和MS分析檢測技術來篩選并鑒定其內在的抗氧化活性成分。實驗結果表明:葛根異黃酮中活性成分葛根素、大豆苷和大豆苷元這三種異黃酮具有自由基清除活性。進一步研究采用不同反應體系結合可見分光光度法測定葛根素、大豆苷和大豆苷元這三個物質清除DPPH自由基和HO自由基的能力以及螯合Fe2+金屬離子的能力。結果表明,葛根素、大豆苷和大豆苷元均具有不同程度的自由基清除能力及螯合金屬離子

6、的能力,從而表現(xiàn)為抗氧化活性。其抗氧化活性的強弱與其分子結構中酚羥基的數(shù)目有關。本研究為葛根提取物特別是葛根素對心腦血管疾病治療提供了有力的佐證。
　　 (3)葛根素與鮭魚精子DNA相互作用方式的研究
　　 藥物分子與DNA相互作用的研究對闡述藥物的治病機理及藥物設計方面具有重要意義。本研究采用紫外-可見分光光度法、熒光光譜法和同步熒光光譜法并借助中性紅光譜探針(NR)研究了葛根素與鮭魚精子DNA的相互作用方式。實驗結果