1、一、研究背景：膀胱腫瘤是我國泌尿男生殖系統(tǒng)最常見的腫瘤，其中80％以上為淺表性腫瘤，以多發(fā)和術(shù)后易復(fù)發(fā)為其主要特征，且腫瘤在不斷的復(fù)發(fā)中日趨惡化?？ń槊?BacillusCalmette-Guerin，BCG)是目前防治淺表性膀胱腫瘤最有效的免疫制劑，其在減少腫瘤復(fù)發(fā)數(shù)目、降低復(fù)發(fā)頻率以及預(yù)防低分化膀胱腫瘤進(jìn)展三個方面，均優(yōu)于傳統(tǒng)的化療藥物。采用基因工程技術(shù)構(gòu)建重組卡介苗(recombinantBCG，rBCG)能夠增強(qiáng)BCG的免疫刺激

2、性和抗瘤活性，是目前膀胱腫瘤免疫治療中最有發(fā)展?jié)摿Φ闹委煼椒?。　　二、研究目的?.構(gòu)建高效分泌IL-2和IFN-α2a的卡介苗穿梭表達(dá)載體pMSIL-2和pMSIFN-α2a并大量制備。2.利用電穿孔技術(shù)將pMSIL-2和pMSIFN-α2a分別導(dǎo)入BCG構(gòu)建rBCGIL-2和rBCGIFN-α2a；體內(nèi)、外實驗檢測rBCGIL-2、rBCGIFN-α2a和rBCG聯(lián)合治療組的生物學(xué)活性及免疫刺激作用，探討它們的免疫作用機(jī)制。3.體

3、內(nèi)、外實驗檢測rBCGIL-2和rBCGIFN-α2a的抗膀胱腫瘤免疫治療作用及免疫保護(hù)作用，探討rBCG的抗腫瘤機(jī)制以及兩者之間的協(xié)同作用，為rBCGIL-2和rBCGIFN-α2a應(yīng)用于膀胱腫瘤的免疫治療提供實驗依據(jù)。 三、主要研究內(nèi)容：1.卡介苗穿梭表達(dá)載體的構(gòu)建與鑒定2.重組卡介苗的構(gòu)建及其免疫原性研究3.重組卡介苗免疫治療及免疫保護(hù)作用的研究 四、結(jié)果：1.證實所構(gòu)建的卡介苗穿梭表達(dá)載體pMSIL-2和pMSI