1、中國醫(yī)科大學碩士學位論文ATRA誘導NB細胞分化及TrkB表達的研究姓名：佟海俠申請學位級別：碩士專業(yè)：兒科學指導教師：張錦華2000.4.13 7 “ C 水浴復蘇人N B 細胞系S M S —K C N R ，并立即放在含有l(wèi) s ％駘牛血清、1 0 0 I U ／m l 青霉素、1 0 0 p g ／m l 鏈霉素的R P M ] 1 6 4 0培養(yǎng)灌串，麓子3 7 “ C 、5 ％C o ：、l Q O ％濕度的二鬣億碳培養(yǎng)籍中

2、培養(yǎng)，每3 - 4 必換液一次。當細胞達到8 0 ％匯合狀態(tài)時做傳代處理。二、實駿分組l 、禱A , T R A 焉禿求乞簿配或1 0 “ 2 M ／L 縫儲存滾予一∞℃保存。使用時將A T R A 加入培養(yǎng)液申倍比稀釋成5 n M ( 5 ×t 0 。M ／L ) 及5 p M ( 5 ×1 0 一M ／L ) 。對照組用含0 ．1 ％v ／v 的無水穩(wěn)醇的培葵滾處理，驥實驗證甓魏濃愛懿無零乙醇對N B 纓蕤皇長無

3、暖顯影響。2 、將S M S —K c N R 細胞各分成3 組：含5 n M A T R A 的培養(yǎng)液處理靛實驗A 組，含5 弘MA T R A 憋培養(yǎng)滾處理酶實驗B 組及對照組。三、檢測指標及方法1 、活繃胞計數(shù)取指數(shù)生長絮纓穩(wěn)，接種至2 毒魏藉養(yǎng)板，繯耱濃度楚l ×1 0 5個／m l 。分別于A T R A 處理后2 、4 、6 天，用臺盤藍拒染計數(shù)活細胞。對照組朔兩實驗級備設(shè)3 份閽樣標本，每一標本計數(shù)4 次，結(jié)祭浚

4、垮數(shù)±椽準羞表暴。2 、細胞形態(tài)學觀察用作分化研究的細胞以l ×1 0 4 個／c m 2 數(shù)目接種予培養(yǎng)瓶竄。分舅l 在按藥處理茲及處理后2 、4 、s 天，霜倒麓耜差顯徽鏡鼴察細胞形態(tài)學改交。N B 纘胞可有不妖子胞體的短的軸突，分化后的細胞有長予胞體的軸突延伸。觀察時對每瓶細胞選取5 個不同視野的2 0 0 個纓貔，計算綱胞分化百分率。結(jié)果以均數(shù)±撼準差表示。3 、T r k Bm R N A 襲達的