建立IAC-HPLC檢測紅曲米中的桔霉素.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、桔霉素(Citrinin,CIT)是由青霉屬、曲霉屬和紅曲霉的某些菌株產(chǎn)生的一種廣泛污染玉米、大米、小麥等農(nóng)作物的真菌毒素,在紅曲米中的污染尤為普遍,對動物及人類具有腎毒性、致畸性、致癌性等。目前檢測 CIT 的主要方法有薄層層析法、高效液相色譜法、酶聯(lián)免疫吸附檢測法等。 本研究建立了免疫親和柱聯(lián)高效液相色譜法 (Immunoaffinity column-High Performance Liquid Chromatograp

2、hy,IAC-HPLC)檢測紅曲米中的 CIT;并用此方法檢測了 41 份市售及實驗室自制的紅曲米樣品中的 CIT 含量。主要研究內(nèi)容和結(jié)果如下: 1. 抗CIT單克隆抗體免疫親和柱的制備將純化好的抗 CIT單克隆抗體與溴化氰 (CNBr) 活化的瓊脂糖凝膠(Sepharose) 4FF偶聯(lián)。采用紫外掃描鑒定偶聯(lián)反應(yīng),間接競爭ELISA方法及 HPLC 方法檢測制備好的免疫親和柱的柱容量。每根抗 CIT 單克隆抗體免疫親和柱,用

3、0.5mL活化膠,0.50mg抗CIT單克隆抗體,柱容量為0.35μg。 2. 建立了分析紅曲米中 CIT IAC-HPLC該方法線性范圍 100μg/kg~600μg/kg,信噪比為3:1時,最低檢測限為 100μg/kg,超過日本的限量標準(200 μg/kg);紅曲米樣品添加 CIT 標準品 (100μg/kg~600μg/kg),用70%甲醇水溶液提取樣品中 CIT,經(jīng)免疫親和柱凈化、0.01 mol/L 的PBS淋洗、

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