1、目的:掌握流式細胞儀測定外周血細胞角蛋白19(Cytokeratin19)的技術(shù),采用方法成熟、成本相對低廉的淋巴細胞分離液法聯(lián)合流式細胞儀法對外周血中的上述指標進行測定,判斷CK19作為循環(huán)腫瘤細胞的間接標志物的價值,并且得出CK19在腎癌患者外周血中的表達水平以及臨床意義。
　　 方法:選取正常人32例作為對照組,51例腎細胞癌患者作為腎癌組。首先進行對照組和腎癌組間CK19的指標測定,指標選用CD45-CK19+,采用流式

2、細胞儀技術(shù)檢測上述人群外周血中CD45-CK19+的表達情況；再分析腎癌組內(nèi)CK19的表達水平與分期分級的關(guān)系；統(tǒng)計CK19陽性患者組中轉(zhuǎn)移性腎癌患者(metastaticrenal cell carcinoma mRCC)的例數(shù),分析CK19表達情況與轉(zhuǎn)移率的關(guān)系,所有入組的mRCC患者均接受手術(shù)+多吉美靶向治療,最后對于mRCC患者進行隨訪,并測定靶向治療后6個月時CK19的表達水平,對于轉(zhuǎn)移灶的大小變化進行測定,按照實體瘤療效評定

3、標準進行歸類,即完全緩解(CR)、部分緩解(PR)、疾病穩(wěn)定(SD)、疾病進展(PD),最后將mRCC患者預后歸類,治療有效包括CR、PR、SD,無效即PD,判斷CK19水平與靶向治療療效的關(guān)系。結(jié)果參考同類試驗中心關(guān)于CK19的相關(guān)研究結(jié)果,外周血CD45-CK19+數(shù)目低于60個/10萬細胞視為陰性表達,超過上述指標則視為陽性表達。利用SPSS13.0對不同分期、不同分級的CK19表達情況進行統(tǒng)計學分析。
　　 結(jié)果:組間比

4、較結(jié)果32例對照組中5例陽性,陽性率15.63％,51例腎癌患者組中35例陽性,陽性率68.63％,正常對照組與腎癌組CK19表達差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。腎癌組內(nèi)結(jié)果示T1期24例,陽性表達13例,陽性表達率為54.17％,T2期10例,陽性表達6例,陽性表達率為60％,T3期和T4期分別為8例、9例,陽性表達分別為7例、9例,陽性率分別為75％、100％,各期CK19陽性率表達具有統(tǒng)計學差異(P<0.05),且T1+T2期

5、癌與T3+T4期癌之間的陽性表達率的差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05):按組織分化程度分類統(tǒng)計,其中高分化組33例,陽性表達21例,陽性表達率為63.63％,中分化10例,陽性表達7例,陽性表達率為70％,低分化組8例,陽性表達7例,陽性率85％,三組CK19陽性率有統(tǒng)計學差異(P<0.05),且高分化組與中低分化組之間CK19的陽性表達率有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。CK19陽性的患者組中腎癌轉(zhuǎn)移率高于CK19陰性組(P<0.05)。我

6、們隨訪并統(tǒng)計了mRCC患者12例,其中CK19陽性表達9例,CK19陰性表達3例,隨訪至12個月時部分緩解2例,完全緩解1例,疾病穩(wěn)定5例,疾病進展4例。轉(zhuǎn)移性腎癌患者CK19的表達與靶向治療療效無統(tǒng)計學相關(guān)(P>0.05)。
　　 結(jié)論:流式細胞儀的方法能夠測定CK19在外周血中表達水平,并且提示CK19在不同人群的表達情況不同,健康人群低表達,腎癌組高表達；腎癌組內(nèi)不同分期及不同分級患者陽性率亦不同,組織分級高、分期晚的患者