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![三氧化二砷調(diào)控HL-60細(xì)胞hTERT基因啟動(dòng)子及相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子NF-κB機(jī)制研究.pdf_第1頁(yè)](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/19/12/98196c63-c5ab-4e85-8a0c-f49791e74365/98196c63-c5ab-4e85-8a0c-f49791e743651.gif)
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1、目的:研究三氧化二砷(arsenic trioxide,As2O3)對(duì) HL-60細(xì)胞人端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶(Human telomerase reverse transcriptase,hTERT)基因啟動(dòng)子及相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子NF-κB的作用機(jī)制。
方法:1.將不同濃度的As2O3作用 HL-60細(xì)胞,利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)和Western blotting技術(shù)分別檢測(cè)hTERT、NF-κB在mRNA水平和蛋白水平上的變化2.利用
2、RNAi技術(shù)干擾NF-κB基因表達(dá),利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)和Western blotting技術(shù),分別檢測(cè) HL-60細(xì)胞hTERT、NF-κB在mRNA水平和蛋白水平的表達(dá)變化,同時(shí)利用CCK-8分析法,流式細(xì)胞術(shù)分別檢測(cè) HL-60細(xì)胞的增殖和凋亡變化。
結(jié)果:1.不同濃度的As2O3作用于HL-60細(xì)胞后,hTERT、NF-κB在mRNA和蛋白水平上的表達(dá)受到明顯抑制(P<0.01)。2.沉默轉(zhuǎn)錄因子NF-κB的表達(dá)
3、,hTERT、NF-κB在mRNA和蛋白水平的表達(dá)受到明顯抑制(P<0.01)。3.沉默轉(zhuǎn)錄因子NF-κB的表達(dá),有效的抑制HL-60細(xì)胞的增殖(P<0.01),以干擾48h最為顯著。4.沉默轉(zhuǎn)錄因子NF-κB的表達(dá),有效的促進(jìn)HL-60細(xì)胞的凋亡(P<0.01)。
結(jié)論:1.不同濃度的As2O3作用于HL-60細(xì)胞后,可促進(jìn)HL-60細(xì)胞凋亡,并呈一定的量效關(guān)系。2.沉默轉(zhuǎn)錄因子NF-κB的表達(dá)可促進(jìn)HL-60細(xì)胞的凋亡,抑
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