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1、目的:人類錯(cuò)配修復(fù)基因的突變可誘發(fā)癌基因的激活或抑癌基因的夫活,從而啟動(dòng)細(xì)胞癌變.該文通過(guò)對(duì)散發(fā)性食管癌患者,鱗狀細(xì)胞癌和腺癌組織中微衛(wèi)星不穩(wěn)定性的分析,了解其在食管癌患者中的比例,探討微衛(wèi)星不穩(wěn)定性與食管癌發(fā)病的關(guān)系;并進(jìn)一步對(duì)微衛(wèi)星不穩(wěn)定性陽(yáng)性的標(biāo)本進(jìn)行RIZ基因的分析,以便找到食管癌發(fā)生過(guò)程中的目標(biāo)基因,為食管癌的早期診斷和治療提供更有效的依據(jù).方法:所有組織標(biāo)本均取材于河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院胸外科散發(fā)性食管癌患者手術(shù)切除后的大體標(biāo)
2、本.取腫瘤組織以及邊緣切口處正常組織(距離腫瘤組織至少5cm處),立即置入液氮罐速凍,而后迅速保存于-80℃冰箱.采用經(jīng)典方法提取食管的腫瘤組織及正常食管組織的基因組DNA.應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)技術(shù)擴(kuò)增微衛(wèi)星Marker.通過(guò)7﹪變性聚丙烯酚胺凝膠電泳進(jìn)行微衛(wèi)星不穩(wěn)定性分析,與正常標(biāo)本對(duì)比,找出異常條帶.另外,對(duì)微衛(wèi)星不穩(wěn)定性陽(yáng)性患者的基因組DNA進(jìn)行RlZ基因的檢測(cè),結(jié)合PCR-SSCP銀染方法確定該抑癌基因與食管癌的發(fā)生是否具
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