1、尋找新型抗腫瘤藥物是當(dāng)代醫(yī)學(xué)的一項(xiàng)重大挑戰(zhàn)。以順鉑為代表的經(jīng)典鉑類抗腫瘤藥物由于不良反應(yīng)（如骨髓抑制、白細(xì)胞減少、耳毒性、神經(jīng)毒性、神經(jīng)毒性等）及腫瘤耐藥極大地限制了該類藥物的發(fā)展。為了克服現(xiàn)有鉑類藥物的缺陷，我們運(yùn)用多種方法對(duì)兩類極具開(kāi)發(fā)潛質(zhì)的非經(jīng)典金屬抗腫瘤化合物進(jìn)行了研究。
　　 以Pt-Amidine為代表的Pt-Acridine類非經(jīng)典鉑類抗腫瘤化合物，可在非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞中顯示出較順鉑強(qiáng)500倍的抗腫瘤活性，是一類極

2、具潛質(zhì)的非經(jīng)典鉑類抗腫瘤金屬化合物。DNA加合物是鉑類抗腫瘤藥物引起腫瘤細(xì)胞死亡的主要原因，鉑類藥物在腫瘤細(xì)胞內(nèi)攝取、累積、分布、胞內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)及亞細(xì)胞定位的研究對(duì)于鉑類藥物的研究尤為重要。因此，我們首先選用高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法對(duì)于Pt-Amidine在非細(xì)胞體系中產(chǎn)生的DNA加合物進(jìn)行了結(jié)構(gòu)表征分析。通過(guò)對(duì)酶解DNA片段分析表明，Pt-Amidine可以選擇性地與DNA鳥(niǎo)嘌呤堿基結(jié)合產(chǎn)生四種DNA加合物（dG*，dGMP*，dApG*，d

3、TpG*）。運(yùn)用電感耦合等離子體質(zhì)譜法(ICP-MS)對(duì)Pt-Amidine及臨床藥物順鉑不同時(shí)間點(diǎn)下在NCI-H460細(xì)胞內(nèi)的累積及DNA加合物量進(jìn)行了分析。結(jié)果表明，在相同處理濃度下(0.1μM)，Pt-Amidine可以快速在細(xì)胞內(nèi)累積，在細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生高于順鉑60倍的鉑含量。經(jīng)3小時(shí)孵育后，Pt-Amidine可在細(xì)胞內(nèi)以25個(gè)/106核苷酸的頻率產(chǎn)生大量的DNA加合物。細(xì)胞內(nèi)及DNA上大量的鉑加合物迅速轉(zhuǎn)化為腫瘤細(xì)胞存活率快速下降

4、。此外，為了進(jìn)一步標(biāo)記Pt-Acridine在細(xì)胞內(nèi)的分布，基于銅催化的疊氮基-炔基加合反應(yīng)（CuAAC反應(yīng)），通過(guò)以疊氮改造的Pt-Acridine對(duì)該類化合物在NCI-H460細(xì)胞內(nèi)的分布及作用機(jī)制進(jìn)行了研究。結(jié)果表明，Pt-Acridine類化合物可以顯著抑制腫瘤細(xì)胞復(fù)制、轉(zhuǎn)錄，并產(chǎn)生細(xì)胞周期阻滯作用，所產(chǎn)生的轉(zhuǎn)錄抑制作用可能與其在細(xì)胞核仁區(qū)內(nèi)累積并參與rRNA轉(zhuǎn)錄抑制息息相關(guān)。
　　 基于氧化DNA損傷機(jī)理，設(shè)計(jì)合成了六

5、個(gè)全新的單核SchiffBase銅金屬配合物:[CuⅡ(5-Cl-pap)(OAc)(H2O)]·2H2O(1),[CuⅡ(5-Cl-pap)(H2O)2]NO3(2),[CuⅡ(pap)(H2O)2]NO3(3),[CuⅡ(5-NO2-pap)(H2O)2]ClO4·H2O(4),[Cu11(5-CH3-pap)(H2O)2]NO3(5),[CuⅡ(5-NO2-pap)(MeOH)(H2O)(NO3)](6),(5-X-pap=N-2

6、-pyridi-yl-methylidene-2-hydroxy-5-X-phenylamine，X=H，Cl，CH3，NO2)，并運(yùn)用X-ray單晶衍射等方法對(duì)其結(jié)構(gòu)進(jìn)行了表征佐證。運(yùn)用光譜學(xué)方法對(duì)所得新型SchiffBase銅金屬配合物與小牛胸腺DNA的相互作用進(jìn)行了研究，其表觀結(jié)合常數(shù)(Kapp=6.40×105,7.11×105,8.96×105,2.44×105,3.09×105,2.56×105M-1)表明配合物與DNA呈現(xiàn)

7、中等強(qiáng)度結(jié)合。SchiffBase銅金屬配合物還可以通過(guò)氧化DNA損傷途徑引起pUC(1)9質(zhì)粒DNA產(chǎn)生DNA切割活性。機(jī)理研究表明，該類化合物可以單線態(tài)氧及過(guò)氧化物作為其活性中間體引起質(zhì)粒DNA氧化損傷。使用MTT法對(duì)SchiffBase銅金屬化合物在10種不同組織來(lái)源的人腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞毒性進(jìn)行了評(píng)價(jià)，表明該類化合物可以通過(guò)與順鉑完全不同的方式抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)。Hoechst33342單染及單細(xì)胞凝膠電泳實(shí)驗(yàn)揭示了配合物3可以導(dǎo)致H