1、目的:根據(jù)前期所做的實驗研究工作,觀察到實驗高壓電燒傷后動物的大體標(biāo)本腸系膜、肝臟、深筋膜、腸黏膜、胃黏膜、腎皮質(zhì)、軟腦膜等的微循環(huán)變化,發(fā)現(xiàn)高壓電不僅引起遠(yuǎn)隔器官的微循環(huán)紊亂,而且還引起外周組織微循環(huán)紊亂,從而導(dǎo)致全身性微循環(huán)障礙,進(jìn)一步引起機(jī)體損傷,微觀的表現(xiàn)可以觀察到白細(xì)胞沿壁翻滾及黏附、白色微小血栓流動及紅細(xì)胞聚集現(xiàn)象等。已有實驗證明黏附分子免疫球蛋白超家族在白細(xì)胞沿壁翻滾及早期黏附中起著重要作用。我們設(shè)計本實驗旨在通過觀察高壓

2、電燒傷大鼠免疫球蛋白超家族黏附分子ICAM-1、VCAM-1、PECAM-1在肺臟組織的連續(xù)變化,進(jìn)一步探討高壓電燒傷微循環(huán)紊亂的機(jī)制,及己酮可可堿對肺臟組織免疫球蛋白超家族表達(dá)的干預(yù),為高壓電燒傷后微循環(huán)障礙防治提供理論依據(jù),盡最大可能的降低病人的死亡率,提高生存率,為臨床用藥提供一定的實驗基礎(chǔ)。
　　 方法:
　　 1實驗動物分組:成年健康雄性SD大鼠(河北醫(yī)科大學(xué)動物實驗中心提供,合格證編號(1010160)180

3、只,隨機(jī)分成三組,分別為高壓電燒傷實驗組(簡稱實驗組)、高壓電燒傷己酮可可堿(PTX)治療組(簡稱治療組)與假高壓電燒傷組(簡稱對照組),每組各60只。對照組、高壓電燒傷實驗組和PTX治療組又分別分為電擊前、電擊即刻(15min內(nèi))(T1)、傷后1小時(T2)、2小時(T3)、4小時(T4)、8小時(T5)6個不同的時相,并有空白對照組,為非電擊非治療組(T0),每組10只。各組分別編號后分籠飼養(yǎng)。
　　 2實驗前準(zhǔn)備:大鼠稱重

4、,按大鼠編號記錄在冊。將實驗藥品按實驗需要配成所需濃度。
　　 3高壓電燒傷模型復(fù)制:將變壓器及調(diào)壓器正確連接待用,用1％戊巴比妥鈉按40mg/kg給藥麻醉大鼠,待麻醉成功后,給予大鼠左上肢、右下肢及胸部備皮,然后將大鼠仰臥于動物絕緣臺上,四肢伸展固定于高壓輸出電路之間,并分別固定1cm2圓形銅制電極片于大鼠的左上肢、右下肢脫毛區(qū),左上肢為入口,右下肢為出口。接通電源調(diào)整變壓器輸出電壓10千伏,給予實驗組與治療組實驗動物分別電擊

5、三秒鐘,對照組給予假電,整個過程中無電流通過,其他條件各組均相同。治療組在電擊后即刻腹腔注射1％PTX(按50mg/kg即5ml/kg給藥),對照組及電擊組電擊后立即腹腔給予注射5ml/kg生理鹽水。
　　 4標(biāo)本采集與保存:將復(fù)制成功高壓電燒傷大鼠模型麻醉后開胸,直視下采左上肺,以肺尖組織為代表,收集0.5cm×0.5cm×0.5cm大小心尖組織,做成石蠟切片,保存待用。
　　 5指標(biāo)檢測:采用免疫組織化學(xué)方法分別檢測

6、電燒傷早期不同時相肺臟組織中ICAM-1、VCAM-1、PECAM-1表達(dá)情況,及己酮可可堿對三項指標(biāo)的干預(yù)效果。
　　 6實驗數(shù)據(jù)處理:所有計量資料用SPSS13.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析處理,實驗數(shù)據(jù)均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差((X)±s)表示,采用兩因素析因設(shè)計的方差分析(ANOVA)對實驗得到數(shù)據(jù)進(jìn)行分析,以p＜0.05為有顯著性差異。
　　 結(jié)果:肺臟組織中ICAM-1、VCAM-1、PECAM-1的變化;
　　

7、 1對照組組內(nèi)比較無顯著性差異(p＞0.05)。
　　 2高壓電燒傷后早期實驗組不同時相肺臟組織ICAM-1、VCAM-1、PECAM-1水平高于對照組及電前ICAM-1、VCAM-1、PECAM-1的水平(p＜0.05);其中ICAM-1表達(dá)水平是從電擊后15分鐘開始增高,并持續(xù)到8小時;VCAM-1傷后15分鐘開始增多,電擊傷后2小時表達(dá)明顯升高,傷后4小時即達(dá)到峰值,到傷后8小時有所降低,但仍未恢復(fù)電擊前水平;PECA-1

8、傷后4小時表達(dá)量達(dá)高峰,以后隨時間下降,但到傷后8小時仍高于對照組。
　　 3高壓電燒傷后早期PTX治療組不同時相肺臟組織ICAM-1、VCAM-1、PECAM-1高于對照組及電前肺臟組織ICAM-1、VCAM-1、PECAM-1的水平(p＜0.05),但同一時相較電擊組肺臟組織ICAM-1、VCAM-1、PECAM-1的水平有不同程度下降;其中VCAM-1的表達(dá)水平傷后8小時下降明顯,PECAM-1的表達(dá)水平在傷后2小時下降明

9、顯;大鼠肺臟組織ICAM-1、VCAM-1、PECAM-1的表達(dá)水平在8小時時相治療組與電擊組組間比較有所降低,有顯著性差異(p＞0.05)。
　　 結(jié)論:
　　 1實驗高壓電燒傷早期大鼠肺臟組織ICAM-1、VCAM-1、PECAM-1表達(dá)均有不同程度升高,在造成微循環(huán)障礙方面有重要作用。
　　 2高壓電燒傷早期PTX治療組ICAM-1、VCAM-1、PECAM-1與實驗組比較明顯降低,但仍高于對照組,PTX治