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1、目的：研究GeranylgeranyltransferaseⅠ(GGT)對(duì)腦膠質(zhì)瘤U251細(xì)胞遷移及侵襲的影響，為腦膠質(zhì)瘤的治療提供新的靶點(diǎn)。
方法：1.應(yīng)用Western blot方法檢測(cè)轉(zhuǎn)染GGTβ siRNA及RalB siRNA后腦膠質(zhì)瘤U251細(xì)胞中相應(yīng)蛋白表達(dá)情況。2.應(yīng)用劃痕實(shí)驗(yàn)和Transwell遷移實(shí)驗(yàn)檢測(cè)用siRNA下調(diào)GGTβ或RalB表達(dá)對(duì)腦膠質(zhì)瘤U251細(xì)胞遷移能力的影響。3.采用Transwell侵
2、襲實(shí)驗(yàn)檢測(cè)轉(zhuǎn)染GGTβ siRNA或RalB siRNA后腦膠質(zhì)瘤U251細(xì)胞侵襲能力的變化。4.應(yīng)用明膠酶譜法分析MMP－2的活性。5.Western blot檢測(cè)轉(zhuǎn)染GGTβ siRNA對(duì)RalB上膜的影響。
結(jié)果：1.分別轉(zhuǎn)染GGTβ siRNA和RalB siRNA48h后可檢測(cè)到GGTβ和RalB蛋白水平下調(diào)，提示小干擾構(gòu)建成功。2.與對(duì)照組相比，用siRNA下調(diào)GGTβ及RalB的表達(dá)可降低腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞的遷移能力(
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