1、目的：利用超小超順磁性氧化鐵(USPIO)核磁共振對比劑體外標記調(diào)節(jié)性T細胞,檢測USPIO對比劑對調(diào)節(jié)性T細胞的生物學(xué)影響,從而為核磁共振成像(MRI)在器官移植受者中監(jiān)測回輸體內(nèi)的USPIO標記的調(diào)節(jié)性T細胞的分布等提供依據(jù)。
　　方法：采用調(diào)節(jié)性T細胞(regulatory T cell,Treg)分選試劑盒分離純化小鼠自然Treg。將分離出的小鼠脾臟淋巴細胞與濃度分別為0.01、0.05、0.10、0.15mg/ml的二巰

2、基琥珀酸(DMSA)包被的USPIO共孵育3h,6h,12h,24h,采用普魯士藍染色和原子吸收分光光度計法檢測USPIO的淋巴細胞攝取率,并用采用噻唑藍(MTT)活細胞染色方法檢測標記后的淋巴細胞的活性。篩選出合適的USPIO濃度,以該濃度的USPIO標記分離純化的Treg。流式細胞儀檢測(FCM)USPIO標記前后的Treg內(nèi)Foxp3的表達狀況。通過對Treg對淋巴細胞增殖的抑制作用的檢測來判斷Treg的功能變化。MRI掃描用瓊脂

3、凝膠固定的USPIO標記的細胞懸液,了解標記前后的細胞信號變化情況。
　　結(jié)果：Treg能夠攝取USPIO,USPIO的攝取量隨USPIO的濃度改變而變化,USPIO的濃度越大Treg攝取的量越大,反之亦然;USPIO在一定濃度范圍內(nèi),對Treg生物學(xué)特性如細胞活性、細胞表型等無明顯影響,仍能使Treg維持一定的免疫調(diào)節(jié)功能。MRI掃描圖像顯示USPIO標記的TregT2加權(quán)相信號明顯降低。
　　結(jié)論：DMSA包被的USPI