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![異常表達(dá)長(zhǎng)鏈非編碼RNA在腦膠質(zhì)瘤中的功能研究.pdf_第1頁(yè)](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/19/12/67020d33-372f-4784-8494-b373826f070c/67020d33-372f-4784-8494-b373826f070c1.gif)
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1、膠質(zhì)瘤是成人最常見(jiàn)的腦內(nèi)原發(fā)性腦腫瘤,惡性程度高,預(yù)后差,占中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤的50%以上。手術(shù)、放療、化療仍是治療膠質(zhì)瘤的主要途徑,但接受治療的病人其預(yù)后仍不樂(lè)觀。長(zhǎng)鏈非編碼RNA(long non coding RNA,lncRNA)是一類(lèi)轉(zhuǎn)錄本長(zhǎng)度超過(guò)200nt的RNA,其本身并不編碼蛋白。然而越來(lái)越多的研究發(fā)現(xiàn)長(zhǎng)鏈非編碼RNA影響著腫瘤生長(zhǎng)。前期通過(guò)基因芯片技術(shù),我們發(fā)現(xiàn)了一些在膠質(zhì)瘤組織異常表達(dá)的長(zhǎng)鏈非編碼,例如(ak12580
2、9,ak098473, uc002ehu.1, bc043564,NR_027322,UBE2CP3-001, loc285194。)
最近有研究報(bào)道長(zhǎng)鏈非編碼RNA loc285194通過(guò)結(jié)合抑癌基因的結(jié)構(gòu)域發(fā)揮調(diào)控作用,從而抑制骨肉瘤的生長(zhǎng),然而在腦膠質(zhì)瘤中并沒(méi)有報(bào)道過(guò)該長(zhǎng)鏈非編碼RNA對(duì)其影響。先前的實(shí)驗(yàn)中,我們發(fā)現(xiàn)loc285194在腦膠質(zhì)瘤中低表達(dá)。為了進(jìn)一步研究lncRNA285194在腦膠質(zhì)瘤中的影響,我們采用了
3、以下實(shí)驗(yàn)方法:熒光定量PCR驗(yàn)證lncRNA loc285194在膠質(zhì)瘤樣本以及U87細(xì)胞中的表達(dá);構(gòu)建過(guò)表達(dá)lncRNA loc285194的U87穩(wěn)定細(xì)胞株; CCK8檢測(cè)細(xì)胞增殖能力;流式細(xì)胞儀檢測(cè)凋亡能力。結(jié)果:1、lncRNA loc285194在膠質(zhì)瘤樣本中低表達(dá)且于腫瘤的惡性程度存在相關(guān)性;2、上調(diào)lncRNA loc285194能抑制U87細(xì)胞的增殖;3、上調(diào)lncloc285194能促進(jìn)細(xì)胞凋亡。結(jié)論:在膠質(zhì)瘤細(xì)胞中上
4、調(diào)lncRNA loc285194能減慢膠質(zhì)瘤細(xì)胞的生長(zhǎng),提示lncRNAloc285194可能成為一個(gè)新的治療靶點(diǎn)。
LncRNA UBE2CP3-001是研究的第二條長(zhǎng)鏈非編碼RNA,其在膠質(zhì)瘤中呈現(xiàn)出高表達(dá)。該基因位于4號(hào)染色體長(zhǎng)臂12區(qū)帶。目前沒(méi)有任何文獻(xiàn)報(bào)道該基因在腦膠質(zhì)瘤中的作用,也未有報(bào)道其在其他腫瘤中的作用,從而其相對(duì)于lncRNA loc285194來(lái)講的意義更大。為了進(jìn)一步了解其在腦膠質(zhì)瘤中的功能,我們采用
5、了與研究lncRNA loc285194類(lèi)似的實(shí)驗(yàn)方法:1、構(gòu)建慢病毒載體及其干擾序列,敲低LncRNA UBE2CP3-001在膠質(zhì)瘤細(xì)胞中的表達(dá),篩選后得到穩(wěn)定的細(xì)胞系;2、細(xì)胞功能實(shí)驗(yàn);3、小鼠模型構(gòu)建,體內(nèi)實(shí)驗(yàn)。結(jié)果:1、低表達(dá)的LncRNA UBE2CP3-001腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞的遷徙能力,侵襲能力,增值能力較空白組明顯下降;2、MMP9作為腦膠質(zhì)瘤遷徙及侵襲能力的重要影響因子,敲低LncRNA UBE2CP3-001的腦膠質(zhì)瘤細(xì)
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