1、在世界范圍內(nèi)，子宮頸癌（Cervical Cancer）是嚴重威脅婦女健康的主要惡性腫瘤之一。發(fā)病率居女性惡性腫瘤的第二位，近年來宮頸癌的發(fā)病率逐步上升且趨于年輕化，早期篩查宮頸癌前病變可阻斷宮頸癌的發(fā)生，目前宮頸癌篩查的主要手段是細胞病理學檢查和高危型人乳頭狀瘤病毒（high risk human papillomavirus，HR-HPV）檢測。細胞病理學檢查敏感性一般在55％～80％左右，但一旦發(fā)現(xiàn)異常細胞，特異性可達到90％以上

2、。HPV檢測雖敏感性高，但特異性一般在30％左右，這是由于大多數(shù)HPV陽性的病人可自然轉(zhuǎn)陰，并不一定進展為宮頸癌。因而，從宮頸癌篩查及早期診斷角度出發(fā)，迫切需要其它可靠指標或手段來協(xié)助以上檢查，使篩查更準確、可靠及更有預測性。
　　 宮頸上皮內(nèi)瘤變（cervical intraepithelial neoasia， CIN）發(fā)展到宮頸浸潤癌需要經(jīng)過一個較長的階段，并且低級別宮頸上皮內(nèi)瘤變絕大多數(shù)都可自然回退，僅極少部分進展為癌。

3、近年來的研究表明，人類大多數(shù)腫瘤細胞，特別是實體腫瘤細胞，常表現(xiàn)為染色體不穩(wěn)定性（chromosome instability，CI），即染色體數(shù)目的改變和染色體結(jié)構(gòu)異常。宮頸細胞由非典型性發(fā)育異常向?qū)m頸癌轉(zhuǎn)變的過程中幾乎都伴有3號染色體長臂擴增。其中，涉及到的最重要的基因可能是人類染色體端粒酶RNA亞單位（Human telomerase RNA component，hTERC）基因。該基因的擴增可阻止細胞凋亡，導致腫瘤產(chǎn)生。因此，h

4、TERC基因的異常擴增可能是宮頸癌形成的早期事件。本研究利用熒光原位雜交（fluorescence in situ hybridization， FISH）方法，通過檢測正常宮頸及不同級別上皮內(nèi)病變患者宮頸脫落細胞內(nèi)hTERC基因的表達，探討hTERC基因在子宮頸癌發(fā)生、發(fā)展進程中所起的作用，為子宮頸癌的篩查及早期診斷提供依據(jù)。材料和方法
　　 1.研究對象
　　 選取2008年6月至2009年1月鄭州大學第三附屬醫(yī)院婦

5、科門診和住院患者共100例，選取2008年3月至2009年3月河南省腫瘤醫(yī)院婦科門診和住院患者共79例，收集其宮頸脫落細胞標本。納入標準：所有研究對象均簽署知情同意，同時須有組織病理學結(jié)果，按照宮頸上皮內(nèi)瘤樣病變診斷處理規(guī)范分為CINⅠ、Ⅱ、Ⅲ級，宮頸癌診斷按照《婦產(chǎn)科學》第六版診斷標準。
　　 排除標準：除外先天性遺傳病、妊娠、生殖道急性炎癥和嚴重內(nèi)科疾病患者。
　　 患者年齡21～61歲，平均36.89±8.72歲。

6、所有患者均行陰道鏡檢查，并經(jīng)陰道鏡下取活檢，常規(guī)送病理檢查。
　　 2.實驗方法
　　 采用液基細胞技術(shù)TCT（ThinPrep（）Cytology Test）方法采集宮頸脫落細胞，按照2001版的TBS（The Bethesda System）系統(tǒng)進行細胞病理學診斷，分為未見上皮內(nèi)病變或惡性細胞（Negative for Intraepithelial Lesion or Malignancy， NILM），無明確診斷

7、意義的非典型鱗狀上皮細胞（Atypical Squamous Cells of Undetermined Signification，ASC-US）、非典型鱗狀上皮細胞不除外高度鱗狀上皮內(nèi)病變（Atypical Squamsus cells-Cannot exclude HSIL，ASC-H）、低度鱗狀上皮內(nèi)病變（Low-grade squamous Intraepithelial Lesion，LSIL）、高度鱗狀上皮內(nèi)病變（High

8、-grade squamous Intraepithelial Lesion，HSIL）和宮頸癌標本。利用薄層液基細胞學技術(shù)，用其剩余標本5～10ml細胞懸液進行FISH操作，檢測不同級別上皮內(nèi)病變及宮頸癌患者脫落細胞內(nèi)hTERC基因的表達。采用二代雜交捕獲（Hybrid Capture2，HC2）技術(shù)方法檢測高危型HPV感染情況。
　　 3.統(tǒng)計學分析
　　 所有數(shù)據(jù)均采用SPSS11.5進行處理，多樣本均數(shù)比較采用t

9、檢驗，率和構(gòu)成比之間的比較采用X2檢驗，以α=0.05作為檢驗水準。兩種診斷方法的比較采用ROC曲線分析。
　　 結(jié)果：
　　 1.細胞學異常組（ASCUS組、LSIL組、HSIL組、鱗狀細胞癌組）與正常細胞學對照組比較，hTERC基因陽性率差異有顯著統(tǒng)計學意義（P<0.001）。
　　 2.HSIL組、宮頸癌組hTERC基因陽性率分別顯著高于ASCUS組與LSIL組（P<0.001）。
　　 3.CIN

10、Ⅱ/Ⅲ組和宮頸癌組的hTERC陽性率均顯著高于正常對照組，（P<0.001）。且CINⅡ/Ⅲ組和宮頸癌組的陽性率顯著高于CINⅠ組，P值分別為0.0004和0.0001。
　　 4.ASC-US、ASC-H、LSIL、HSIL以上組中高危型HPV DNA陽性率分別為54.8％（17/31）、75.0％（3/4）、60.7％（17/28）和92.3％（12/13），HSIL以上組高危型HPVDNA陽性率明顯高于ASC-US組（P<

11、0.05），ASC-US、ASC-H、LSIL之間相比則差異無顯著性（P>0.05）。
　　 5.以組織病理學診斷為金標準，將CINⅡ及其以上診斷定為陽性，利用ROC曲線比較FISH法檢測hTERC基因和細胞學結(jié)合TBS分級預測CINⅡ/Ⅲ以上患者的敏感度和特異度。以LSIL為界點，細胞學檢測CINⅡ及其以上患者的敏感度為76.8％，特異度為93.7％；以陽性細胞>8％為界點，F(xiàn)ISH法檢測CINⅡ及其以上患者的敏感度為79.8

12、％，特異度為83.4％。細胞學和FISH法的ROC曲線下面積分別為：0.913和0.862，二者相比無顯著性差異。
　　 結(jié)論：
　　 1.隨細胞學病變程度增加，hTERC基因陽性表達率具有增加趨勢。
　　 2.端粒酶。hTERC基因的擴增與宮頸癌發(fā)生、發(fā)展具有相關(guān)作用。
　　 3.FISH技術(shù)檢測上皮內(nèi)病變和細胞學相比在總體的敏感度和特異度上無顯著性差異。但用兩種方法作為初篩CIN均有較高價值，兩者結(jié)合