1、2型糖尿病是復雜的基因遺傳背景與現(xiàn)代生活方式(能量攝入過多及體力活動減少)共同作用而導致胰島素作用障礙(胰島素抵抗)和胰島素分泌相對缺陷。 胰島素是已知最重要的代謝調(diào)節(jié)激素，能快速有效地調(diào)節(jié)糖、脂代謝。此外，胰島素還有促生長、增殖、分化的功能。大量研究證實，在肥胖和2型糖尿病的胰島素抵抗狀態(tài)下，胰島素促生長增殖的效應并沒有受損，反而有加強的表現(xiàn)，有人認為這可能是胰島素抵抗與動脈粥樣硬化相關的原因。因此，用胰島素治療2型糖尿病，在

2、降低血糖、調(diào)節(jié)血脂的同時，是否加重高胰島素血癥?是否增加遠期大血管病變的危險?這一顧慮成為早期使用胰島素治療2型糖尿病的障礙。目前的治療模式是，直到多種口服降糖藥聯(lián)合作用失效才使用外源性胰島素。 但是，近年的臨床研究使人們對早期胰島素治療的價值有新的認識。我們的前期臨床研究對早期診斷的2型糖尿病患者使用胰島素治療，除了快速解除高血糖等代謝紊亂，還能在相當程度上改善胰島β細胞功能。這種治療收益可能對改善2型糖尿病的預后、延緩疾病的

3、進展帶來好處。這一新的臨床發(fā)現(xiàn)對早期胰島素治療的利與弊提出新的挑戰(zhàn)。 我們擬借助理想的2型糖尿病動物模型，深入研究早期胰島素治療對胰島β細胞的保護作用，以及對胰島素主要靶器官(肝臟、血管內(nèi)皮、脂肪組織、肌肉組織)信號通路的作用及其機制。由于肝臟在機體的糖、脂代謝調(diào)節(jié)中起重要作用，肝臟胰島素抵抗在2型糖尿病的發(fā)生機制中起重要作用，肝臟的胰島素抵抗也是2型糖尿病治療的重要靶點，因此，本研究以C57BL/6小鼠建立2型糖尿病模型，研究

4、胰島素干預對肝臟糖、脂代謝以及胰島素信號途徑的調(diào)節(jié)作用。 第一章肥胖與2型糖尿病動物模型的建立——高脂飲食誘導C57BL/6小鼠的代謝異常一、研究目的建立類似人類2型糖尿病病理生理特點的動物模型。 二、研究方法1.實驗動物及分組雄性C57BL/6小鼠30只，5周齡，分為A、B、C組，每組10只。A組給予普通標準小鼠飼料，B和C組給予高脂飼料喂養(yǎng)。 2.飼料配制普通標準小鼠飼料脂肪含量為4.43g/100g，供熱百

5、分比為9.9％。高脂飼料脂肪含量占38.2g/100g，供熱百分比為60％。 3.評估指標(1)體重(2)非空腹血糖(3)經(jīng)腹葡萄糖耐量試驗(IPGTT)(4)血脂：游離脂肪酸(FFA)、甘油三酯(TG)和總膽固醇(TC)(5)肝臟脂肪含量 三、結(jié)果(1)高脂組小鼠體重顯著高于對照組。高脂組小鼠呈現(xiàn)明顯腹型肥胖。(2)高脂組非空腹血糖顯著高于對照組。(3)高脂組空腹血糖顯著高于對照組。給予葡萄糖刺激后各觀察時點血糖，高脂

6、組均顯著高于對照組。而且高脂組血糖高峰延遲至注射后30分鐘。(4)高脂喂養(yǎng)組的FFA及TC均高于普通喂養(yǎng)組。TG水平在兩組間無統(tǒng)計學差異。(5)高脂組小鼠肝臟蘇丹Ⅲ陽性染色區(qū)面積明顯高于對照組。 四、結(jié)論我們成功地以高脂肪含量的飲食誘導C57BL/6小鼠發(fā)生肥胖、胰島素抵抗、糖調(diào)節(jié)受損。該模型類似人類2型糖尿病的特點，可作為2型糖尿病發(fā)病機理研究和治療機制研究的天然理想模型。 第二章胰島素干預對C57BL/6糖尿病小鼠肝

7、臟胰島素抵抗的影響一、研究目的通過基因芯片技術研究早期胰島素干預對肝臟糖、脂代謝功能及胰島素信號途徑的調(diào)節(jié)作用。 二、研究方法1.胰島素干預：高脂喂養(yǎng)12周的C57BL/6小鼠給予甘精胰島素干預兩周。2.測定血脂和肝臟脂肪含量3.提取肝臟組織總RNA，用于基因芯片和RT-PCR。4.基因芯片技術測定肝臟胰島素信號通路100個靶基因的差異表達。5.RT-PCR擴增Glut2基因，凝膠電泳定量分析表達量差異。 三、結(jié)果1.血

8、脂水平：胰島素干預組的TC和TG均比無干預組顯著降低。干預組的FFA比無干預組有下降趨勢。 2.肝臟脂肪含量：胰島素干預組小鼠肝臟陽性染色區(qū)面積明顯少于無干預組。 3.基因芯片結(jié)果：總共有45個基因發(fā)生顯著改變，其中高脂喂養(yǎng)后Akt表達下調(diào)；PI3K的p85亞基表達增多；Ptpn1表達增多；Cap、Cbl和Crk2表達下降；Srebf-1表達增高。胰島素干預后，Akt、p85、Ptpn1和Srebf-1的表達水平得到恢復