1、輔酶A是生物體內?；D移酶的輔酶，臨床上用于治療白細胞減少癥、原發(fā)性血小板減少性紫癜及功能性低熱等。輔酶A現行質量標準收載于衛(wèi)生部藥品標準二部第六冊生化藥品標準第一分冊，國外標準均未收載。本文根據新藥注冊的要求，參考現行輔酶A質量標準以及輔酶A分子結構和生產工藝的特點，建立了輔酶A有關物質、溶劑殘留、金屬離子和含量的測定方法。
　　 1、有關物質：采用梯度洗脫高效液相色譜法檢查有關物質。色譜柱為C18柱（250×4.6m，5μ

2、m）；流動相A：磷酸鹽緩沖溶液（pH6.5）-甲醇（90：10），流動相B：甲醇：0.02％庚烷磺酸鈉溶液（50：50），梯度洗脫；檢測波長為259nm。方法檢測限為16ng，樣品有關物質含量為10.8％～45.1％。
　　 2、殘留溶劑：采用氣相色譜法測定輔酶A中殘留溶劑丙酮、巰基乙醇的含量。色譜柱為HP-INNOWAX毛細管柱（30m×0.53mm，1μ m），氫火焰離子化檢測器，載氣為高純N2，頂空進樣。丙酮、巰基乙醇的濃

3、度在10～240μg/ml范圍內與峰面積呈良好的線性關系（r>0.999），方法RSD分別為0.73％、0.57％（n=6），檢測限分別為1.1ng、3.7ng。樣品丙酮含量為0.06～4.22％，巰基乙醇含量為0.12～0.38％。
　　 3、金屬離子：樣品經密閉微波消解后，采用ICP-AES法測定輔酶A中鋰、鈉、鈣3種金屬元素的含量。儀器參數為：射頻功率：1250W，載氣流速：1.0L/min，輔氣流速：15L/min，樣品

4、提升速率：1.85ml/min。在0～16μg/ml濃度范圍內，各元素的分析信號強度值與濃度均呈良好的線性關系（r>0.999），鋰、鈉、鈣元素的檢測限分別為1.29μg/ml、3.42μg/ml、30.72μg/ml，測定方法RSD分別為1.7％、3.4％、1.8％（n=6），各元素的平均加樣回收率為96.3％～106.5％。樣品中鋰含量為10.8～22.2mg/g，鈉含量為0～2.1mg/g，鈣含量為2.3～4.7mg/g。

5、　　 4、含量測定：采用高效液相色譜法測定輔酶A的含量。色譜柱為C18柱（250×4.6mm，5μ m），流動相為磷酸鹽緩沖溶液（pH6.5）-甲醇（90：10），檢測波長為259nm。輔酶A濃度在30～270μg/ml范圍內與峰面積呈良好的線性關系（r=0.99995），方法RSD為0.5％（n=6），定量限為98ng，樣品含量為48.08％～84.44％。本文采用除雜質法確定輔酶A標準品的含量，并驗證了高效液相色譜法測定含量與酶法