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文檔簡介
1、本研究分成四個(gè)部分: 一構(gòu)建羊膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)平臺(tái),并對(duì)其生物學(xué)特性進(jìn)行初步探索 采用細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)分離、培養(yǎng)人羊膜上皮細(xì)胞。對(duì)人羊膜上皮細(xì)胞進(jìn)行神經(jīng)標(biāo)志物(GFAP、MAP-2、Nestin)的免疫組化檢測;觀測HAECs條件培養(yǎng)液對(duì)大鼠神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的影響;將HAECs進(jìn)行成年健康大鼠的體內(nèi)移植實(shí)驗(yàn),觀察細(xì)胞存活和遷移情況。在本部分實(shí)驗(yàn)中,成功建立了羊膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)平臺(tái);證實(shí)羊膜上皮細(xì)胞能表達(dá)神經(jīng)特異性標(biāo)志物和神經(jīng)干細(xì)胞特異性標(biāo)志
2、物,能分泌神經(jīng)營養(yǎng)因子;移植到動(dòng)物體內(nèi)能較長時(shí)間存活并具有一定的遷移能力,不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)。本部分實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明,HAECs可以成為新的神經(jīng)移植的種子細(xì)胞?! 《⒋笫蠹顾钃p傷模型,觀察大鼠在不同程度脊髓損傷下的病理變化、自發(fā)恢復(fù)過程以及最終恢復(fù)的程度,為正確評(píng)價(jià)移植療效提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)?! ”静糠謱?shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明,脊髓的全切、半切都能造成穩(wěn)定、可重復(fù)的脊髓損傷模型,但半切損傷不會(huì)引起明顯的運(yùn)動(dòng)、膀胱功能障礙;脊髓全切的功能障礙明顯,形態(tài)
3、變化清晰,是評(píng)價(jià)治療措施效果的較好模型?! ∪龑⒃囵B(yǎng)的人羊膜上皮細(xì)胞移植到大鼠脊髓損傷灶,觀察細(xì)胞存活情況以及是否能改善大鼠后肢運(yùn)動(dòng)、膀胱功能?!?在本部分實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),羊膜上皮細(xì)胞比較容易獲得移植所需求的數(shù)量,15×15cm2大小的羊膜上可以培養(yǎng)出1×106個(gè)左右細(xì)胞;移植到損傷脊髓后能長期存活(八周)并與宿主整合良好,無免疫排斥反應(yīng);羊膜上皮細(xì)胞移植能促進(jìn)軸突的再生和脊髓功能的恢復(fù)?! ∷牟捎靡浦厕D(zhuǎn)染GDNF的人羊膜上皮細(xì)
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