1、為探討靶源性(骨骼肌)以外來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子之一,膠質(zhì)細胞源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)在體內(nèi)的作用,該實驗借助于華盛頓大學醫(yī)學院神經(jīng)病學系Dr.Parsadanian AS實驗室通過GFAP啟動子,成功獲得的GDNF在小鼠星型膠質(zhì)細胞過度表達的GFAP-GDNF轉(zhuǎn)基因品轉(zhuǎn)基因鼠為實驗對象,以出生2天小鼠面神經(jīng)切斷為模型,從如下三個方面來研究周圍神經(jīng)損傷后GDNF對運動神經(jīng)元的保護作用及機制:一、為證實在中樞來源(而不是通過全身途徑)的G

2、DNF是否促進運動神經(jīng)元的存活,檢測了新生2天小鼠面神經(jīng)切斷后一周面神經(jīng)核尼氏染色和運動神經(jīng)元計數(shù),觀察到GFAP-GDNF轉(zhuǎn)基因鼠約有90﹪運動神經(jīng)元在損傷后存活.二、為檢驗面神經(jīng)切斷后GDNF促進運動神經(jīng)元的存活是否與抑制損傷后運動神經(jīng)元的細胞凋亡有關(guān),該實驗對比檢測了野生鼠和GFAP-GDNF轉(zhuǎn)基因鼠損傷后面神經(jīng)核團神經(jīng)元的caspase-3激活情況.結(jié)果表明GDNF幾乎能完全抑制由損傷誘導的運動神經(jīng)元的caspase-3的激活,

3、從而抑制了細胞調(diào)亡,促進運動神經(jīng)元的存活.三、為進一步確定GDNF對運動神經(jīng)元的保護作用,檢測了面神經(jīng)切斷后運動神經(jīng)元的標志物之一膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶(ChAT)的表達情況.結(jié)果表明,因為GDNF持續(xù)性表達而存活的運動神經(jīng)元,其功能活性亦得到了很好的維持.該實驗提示:中樞神經(jīng)系統(tǒng)產(chǎn)生的GDNF會顯著促進運動神經(jīng)切斷后其中樞內(nèi)運動神經(jīng)元的長時期存活,并能極好地保護這些神經(jīng)元的基本功能.該作用的途徑之一是與GDNF能夠明顯地抑制損傷后神經(jīng)元的細胞