人運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元生存蛋白Tudor功能域片段的克隆，表達(dá).pdf_第1頁(yè)
已閱讀1頁(yè)，還剩55頁(yè)未讀， 繼續(xù)免費(fèi)閱讀

下載本文檔

版權(quán)說(shuō)明：本文檔由用戶提供并上傳，收益歸屬內(nèi)容提供方，若內(nèi)容存在侵權(quán)，請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡(jiǎn)介

1、目的：構(gòu)建含有人SMN Tudor基因片段的原核表達(dá)質(zhì)粒，并在大腸桿菌中大量表達(dá)，從而與 p100 Tudor 片段結(jié)構(gòu)和功能進(jìn)行比較。 方法：利用聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)方法，擴(kuò)增出人SMN Tudor基因序列，并與原核表達(dá)載體pGEX-4T-1連接形成重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化至作為質(zhì)粒的宿主菌大腸桿菌BL21株中，經(jīng)IPTG誘導(dǎo)融合蛋白表達(dá)并用還原型谷胱甘肽 S 轉(zhuǎn)移酶特異性結(jié)合球珠純化融合蛋白。用同樣的方法表達(dá)p100 Tudor蛋白片

2、段融合蛋白。SMN Tudor融合蛋白與p100 Tudor融合蛋白分別與HeLa細(xì)胞核裂解液中蛋白結(jié)合，并進(jìn)行比較。 結(jié)果：PCR法獲得SIVlN Tudor基因序列，長(zhǎng)度為183bp，成功構(gòu)建了表達(dá)載體pGEX的重組質(zhì)粒。重組質(zhì)粒pGEX-4T-SMN Tudor經(jīng)PCR鑒定，酶切鑒定和測(cè)序后在大腸桿菌BL21株中成功表達(dá)GST-SMN Tudor融合蛋白。通過(guò)比較可以看出p100 Tudor片段與SMN Tudor片段結(jié)合

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無(wú)特殊說(shuō)明，都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等，如果需要附件，請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙，網(wǎng)頁(yè)內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽，若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫(kù)僅提供信息存儲(chǔ)空間，僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理，對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯，并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容，請(qǐng)與我們聯(lián)系，我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

評(píng)論

0/150

提交評(píng)論