幾種AD相關基因的siRNA質粒的構建及其鑒定.pdf_第1頁
已閱讀1頁,還剩47頁未讀 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內容提供方,若內容存在侵權,請進行舉報或認領

文檔簡介

1、RNA干涉(RNAi)技術在實驗室中是一種強大的實驗工具,它是利用具有同源性的雙鏈RNA(dsRNA)誘導特異性的目標基因沉默,迅速降低基因表達水平。siRNA在RNA沉默通道中起中心作用,是對特定信使RNA(mRNA)進行降解的指導要素。
   本研究通過Nucleotide BLAST在線設計含有小發(fā)夾機構的2條I1PP2A、P53和CREB對應模板DNA序列,經(jīng)過褪火、磷酸化、連接處理后克隆至psuppress質粒,構建重

2、組質粒psuppress-siI1PP2A、psuppress-siP53、psuppress-siCREB。通過酶切和測序鑒定重組產(chǎn)物的正確性。然后使用lipofectAMINE 2000轉染試劑將上述構建好的質粒分別轉染HEK293細胞。培養(yǎng)一定時間之后提取蛋白,利用western blot檢測I1PP2A、P53和CREB蛋白水平的變化。結果顯示:經(jīng)酶切及測序鑒定,成功構建了psuppress-siI1、psuppress-siP

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權益所有人同意不得將文件中的內容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內容負責。
  • 6. 下載文件中如有侵權或不適當內容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評論

0/150

提交評論