睡眠肽DSIP的人工合成及應(yīng)用初步研究.pdf_第1頁(yè)
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1、目的:人工合成目的肽DSIP并分析純化,研究其促眠活性,并進(jìn)一步研究經(jīng)鼻腔給藥的促眠作用,同時(shí)探索毒副作用,從而為治療失眠癥提供一種人工合成因而不受來(lái)源限制、質(zhì)量易于控制,在失眠癥的治療中取得較好效果、給藥方便并免除不良副作用,可迅速推廣應(yīng)用的高效外源性促眠藥物。
  方法:利用生物信息學(xué)對(duì)已知結(jié)構(gòu)的天然存在睡眠肽進(jìn)行分析,選擇其α同分異構(gòu)體并采用全化學(xué)合成的固相多肽合成法合成DSIP,通過(guò)高效液相色譜和質(zhì)譜法進(jìn)行純化分析及鑒定,

2、確定合成的多肽即為設(shè)計(jì)需要的目的肽并分析其純度。進(jìn)行分組動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究目的肽的促眠效果:用大鼠初步判定此人工合成的目的肽DSIP是否具有促眠作用;確認(rèn)其效用后第一步用新西蘭大耳白兔判定目的肽經(jīng)靜脈給藥是否如文獻(xiàn)報(bào)道的有誘導(dǎo)新西蘭大耳白兔睡眠的作用;第二步研究鼻腔給藥并比較不同劑量DSIP的促眠效果,初步探索出目的肽鼻腔給藥的適宜劑量。最后通過(guò)病理學(xué)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)人工合成的睡眠肽DSIP在大中劑量中長(zhǎng)期給藥后對(duì)腦組織是否有毒性。
  結(jié)果:

3、1.成功合成具有生物活性的睡眠肽DSIP,經(jīng)高效液相法純化后達(dá)到所需要的95%以上純度,質(zhì)譜法與HPLC法確認(rèn)合成的是目的肽;2.安裝新西蘭大耳白兔腦電極后兔子仍然存活狀況良好,給藥前后均成功引導(dǎo)出新西蘭大耳白兔的腦電圖,記錄數(shù)據(jù)得到有效分析;3.分析腦電圖并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)后,鼻腔給藥組、靜脈給藥組新西蘭大耳白兔均與生理鹽水組新西蘭大耳白兔總睡眠時(shí)間、慢波睡眠時(shí)間統(tǒng)計(jì)學(xué)有顯著性差異,且給藥組慢波睡眠時(shí)間長(zhǎng)、總睡眠時(shí)間長(zhǎng);4.分析腦電圖并

4、進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)后,鼻腔給藥15 nmol/kg組與30 nmol/kg組及45 nmol/kg組新西蘭大耳白兔總睡眠時(shí)間、慢波睡眠時(shí)間統(tǒng)計(jì)學(xué)有顯著性差異,鼻腔給藥30 nmol/kg組、及45nmol/kg組新西蘭大耳白兔與靜注劑量30 nmol/kg組新西蘭大耳白兔總睡眠時(shí)間、慢波睡眠時(shí)間統(tǒng)計(jì)學(xué)無(wú)顯著性差異;5.中長(zhǎng)期大中劑量DSIP靜脈給藥后光鏡下對(duì)照組和給藥組的腦組織切片經(jīng)HE染色經(jīng)肉眼觀察無(wú)明顯差異。
  結(jié)論:1.人工合

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