1、研究背景及目的： 肺癌是目前世界上最常見的惡性腫瘤之一，并居于惡性腫瘤死亡率的第一位，是嚴(yán)重威脅人們健康和生命的疾病。而非小細(xì)胞肺癌(rlon-small cell lung carcinoma，NSCLC)占所有肺癌的80-85％，因此非小細(xì)胞肺癌的病因研究有重要意義。目前，肺癌的致病因素和發(fā)病機(jī)制尚不完全清楚，但在端粒及端粒酶與腫瘤的關(guān)系有了較深入的研究，端粒是真核細(xì)胞染色體末端由DNA重復(fù)序列和多種結(jié)合蛋白組成的特殊保護(hù)性

2、結(jié)構(gòu)。端粒異常將導(dǎo)致染色體不穩(wěn)定，而染色體的不穩(wěn)定性與細(xì)胞衰老和腫瘤密切相關(guān)。端粒功能豐要依靠端粒長(zhǎng)度和端粒結(jié)構(gòu)的保持，端粒酶是細(xì)胞維持端粒長(zhǎng)度的最主要途徑，許多證據(jù)顯示端粒長(zhǎng)度和結(jié)構(gòu)的維持及端粒酶活性受到一組端粒結(jié)合蛋白的調(diào)控。由Chong等首次發(fā)現(xiàn)的第一個(gè)人端粒重復(fù)序列結(jié)合因子1(telomeric repeat bind-ing factor 1，TRFl)是端粒長(zhǎng)度的負(fù)調(diào)控因子，通過干擾端粒酶與染色體末端的結(jié)合，間接的對(duì)端粒長(zhǎng)度

3、進(jìn)行調(diào)控。已經(jīng)有研究表明TRF1在很多腫瘤細(xì)胞的表達(dá)情況及與臨床的關(guān)系，但是TRFl在非小細(xì)胞肺癌組織中的表達(dá)情況研究的很少。本研究目的是檢測(cè)TRF1在非小細(xì)胞肺癌組織中的表達(dá)情況及與病理、臨床的關(guān)系，為臨床診治及預(yù)后判斷提供幫助。 對(duì)象與方法： 用EnVision免疫組織化學(xué)染色法檢測(cè)40例NSCLC患者手術(shù)切除后石蠟包埋標(biāo)本及對(duì)照組37例癌旁正常肺組織TRFl的表達(dá)情況，分析其與NSCLC臨床、病理及患者牛存期的關(guān)系

4、。所有病例均來自于浙江省臺(tái)州醫(yī)院肺癌住院病人手術(shù)切除標(biāo)本，經(jīng)組織病理學(xué)診斷為原發(fā)性非小細(xì)胞型支氣管肺癌。其中男25例，女性15例，年齡為(41-74)歲，平均年齡為(55±7.8)歲。其中鱗狀細(xì)胞癌22例，腺癌13例，肺泡細(xì)胞癌3例，腺鱗癌1例，大細(xì)胞癌1例。按UICC1997年肺癌術(shù)后病理分期(pathological tumor，nodes，metastasis-claSSification，pTNM)標(biāo)準(zhǔn)：Ⅰ期9例，Ⅱ期16例，Ⅲ

5、a期12例，Ⅲb期3例。40例原發(fā)性支氣管肺癌中伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的肺癌23例。 所有石蠟包埋組織標(biāo)本均制成4μm厚連續(xù)石蠟切片，常規(guī)脫蠟至水化。采用EnV—ision法行免疫組織化學(xué)染色。用己知的陽(yáng)性肺癌組織切片同時(shí)同一條件下染色作為陽(yáng)性對(duì)照，用PBS代替一抗作為陰性對(duì)照。TRFl陽(yáng)性顆粒主要分別在腫瘤細(xì)胞的胞漿，以細(xì)胞漿出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽(yáng)性顆粒。而陰性的表現(xiàn)為腫瘤細(xì)胞的胞漿和核均不著色。由兩名病理醫(yī)生分別計(jì)數(shù)其中的陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)和

6、總細(xì)胞數(shù)，取其平均值，按陽(yáng)性細(xì)胞所占總細(xì)胞的百分比來打分：O分為陰性，1分為陽(yáng)性細(xì)胞≤10％，2分為11％-50％，3分為>50％，對(duì)于≥2分的認(rèn)為免疫反應(yīng)陽(yáng)性。并分析TRFl表達(dá)的陽(yáng)性率與臨床、病理及患者生存期的關(guān)系。 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSSll．0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，組間各計(jì)數(shù)資料采用X2檢驗(yàn)進(jìn)行顯著性檢驗(yàn)，P<0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，并用KaplanMeier進(jìn)行生存分析。 結(jié)果： 1.肺癌及癌旁正常組織

7、中TRFl表達(dá)情況：肺癌組織TRFl蛋白表達(dá)陽(yáng)性率為57.5％，而肺癌旁正常組織TRFl蛋白表達(dá)陽(yáng)性率為8.1％，兩者比較P<0.01，有顯著性差異。 2.TRFl蛋白的表達(dá)與NsCLC臨床病理特征的關(guān)系：鱗癌TRFl陽(yáng)性率為59.1％，腺癌TRFl陽(yáng)性率為53.8％；而在其他類型TRFl陽(yáng)性率為60％，三者無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。并且在性別、年齡、是否長(zhǎng)期吸煙、腫瘤大小、淋巴結(jié)是否轉(zhuǎn)移、病理TNM分期、分化程度等的對(duì)比中

8、均無顯著差異(P>0.05)。 3.NscLc組織TRFl的表達(dá)與總生存率的關(guān)系：TRFl表達(dá)陽(yáng)性的NsCLC患者總生存率為60.9％，TRFl表達(dá)陰性的NsCLC患者總生存率為64.7％。兩者無顯著性差異(P>0.05)。 結(jié)論： 1.TRFl在NsCLC組織中表達(dá)的陽(yáng)性率明顯高于癌旁正常組織。 2.TRFl的表達(dá)與NsCLC的組織學(xué)類型、性別、年齡、是否長(zhǎng)期吸煙、腫瘤大小、淋巴結(jié)是否轉(zhuǎn)移、病理TNM分