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![胰島素樣生長(zhǎng)因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)在大鼠生后生長(zhǎng)調(diào)節(jié)中的作用.pdf_第1頁](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/19/13/a46df2b8-b4ec-4be7-8c1f-885bbeddc1a7/a46df2b8-b4ec-4be7-8c1f-885bbeddc1a71.gif)
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1、一、大鼠生后生長(zhǎng)方式。 目的:通過大鼠生后體重、身長(zhǎng)、尾長(zhǎng)連續(xù)性測(cè)量數(shù)據(jù),探討大鼠生后生長(zhǎng)方式。 方法:采用10窩新生SD大鼠,每窩保留8只,從出生到生后27天,每天測(cè)量其體重、身長(zhǎng)和尾長(zhǎng)生長(zhǎng)指標(biāo),準(zhǔn)確記錄出生時(shí)間、測(cè)量時(shí)間。用SAS軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析,獲得大鼠生后生長(zhǎng)變化曲線圖,同時(shí)分析體重、身長(zhǎng)和尾長(zhǎng)生長(zhǎng)速度的變化。在飼養(yǎng)過程中,有部分幼鼠死亡,為保證其正常生長(zhǎng),在生后12~13天,對(duì)母鼠進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充。 結(jié)果
2、:(1)母鼠補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)后無幼鼠死亡發(fā)生,幼鼠生長(zhǎng)較補(bǔ)充前改善,特別是體重的生長(zhǎng); (2)出生時(shí),不同性別和窩別間的大鼠體重、身長(zhǎng)和尾長(zhǎng)均有顯著性差異,雄鼠比雌鼠體重更重、身長(zhǎng)更長(zhǎng),體重及身長(zhǎng)的差值分別為0.335 g(t=4.17,P=0.0002)和0.114 cm(t=-3.03,P<0.005),而雌鼠尾長(zhǎng)比雄鼠長(zhǎng)0.043 cm(t=2.15,P<0.04):(3)生后27天內(nèi),大鼠的體重、身長(zhǎng)和尾長(zhǎng)隨時(shí)間的增加而增加,其生長(zhǎng)速度
3、變化時(shí)間不同,體重的生長(zhǎng)速度從生后第2天開始增加,第3、15、25、27天速度明顯增加,身長(zhǎng)生長(zhǎng)速度從第8天開始緩慢上升,第17天和25天出現(xiàn)明顯增加,尾長(zhǎng)從生后第2天開始增加,第3、7、18天出現(xiàn)明顯增加,第22天以后速度基本呈一條直線;(4)生后第3天,體重、尾長(zhǎng)的速度改變明顯,其加速度值為正值且具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,而身長(zhǎng)速度沒有出現(xiàn)有意義的改變。體重加速度在第25天最大,其次為第27天;身長(zhǎng)的速度變化值在第17天和25天接近,均為有統(tǒng)
4、計(jì)學(xué)意義的正值;尾長(zhǎng)加速度具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的正值較接近,最大值出現(xiàn)在第18天。 結(jié)論:(1)大鼠體重生長(zhǎng)對(duì)營(yíng)養(yǎng)因素最敏感,尾長(zhǎng)生長(zhǎng)受營(yíng)養(yǎng)因素影響最?。?2)大鼠生后體重、身長(zhǎng)、尾長(zhǎng)生長(zhǎng)方式不同,尾長(zhǎng)最早出現(xiàn)生長(zhǎng)速度明顯增加;(3)SD大鼠的青春前期依據(jù)尾長(zhǎng)的生長(zhǎng)情況可能在18天出現(xiàn),依據(jù)體重、身長(zhǎng)的生長(zhǎng)可能在25天出現(xiàn);(4)SD大鼠可能在生后3天左右出現(xiàn)“兒童期”。 二、IGF-I在大鼠“兒童期”出現(xiàn)中的作用。
5、目的:探討IGF-I在大鼠“兒童期”出現(xiàn)中的作用。 方法:采用30窩新生SD大鼠,每窩8只。從出生至生后7天,每天測(cè)量體重、身長(zhǎng)和尾長(zhǎng)生長(zhǎng)指標(biāo),同時(shí)隨機(jī)從每窩取出1只心臟取血處死。血漿IGF-I水平采用ELISA測(cè)定,軟骨細(xì)胞周期分布采用流式細(xì)胞儀測(cè)定,生長(zhǎng)板軟骨細(xì)胞增殖層和肥大層高度應(yīng)用Simpie PCI圖象分析軟件在生長(zhǎng)板HE染色圖像上測(cè)量。 結(jié)果:(1)大鼠體重速度從生后第2天開始快速增加,身長(zhǎng)速度從生后第3天開
6、始增加,尾長(zhǎng)速度從生后第2天開始緩慢增加,三者均在生后第5天達(dá)到最大值;(2)大鼠體重速度變化在生后第3~6天具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,第6天加速度為負(fù)值,身長(zhǎng)速度變化在生后第4、6、7天有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,第6、7天加速度為負(fù)值,尾長(zhǎng)速度變化在第3、5天具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義; (3)大鼠生后7天內(nèi)血漿IGF-I的濃度隨年齡的增加而增加,第3、4、6天增加明顯,第4、6天的增加值具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;(4)出生時(shí)IGF-I與尾長(zhǎng)呈正相關(guān)(P<0.02),與體重、身
7、長(zhǎng)無相關(guān)(P>0.1)。(5)生后7天內(nèi),IGF-I與體重、身長(zhǎng)和尾長(zhǎng)呈正相關(guān),相關(guān)系數(shù)范圍0.34~0.40(P<0.0001),與體重速度呈正相關(guān)(r=0.16,P=0.02),IGF-I的變化與體重、體重速度、身長(zhǎng)呈正相關(guān),相關(guān)系數(shù)分別為0.15(P=0.02),0.16(P=0.01); (6)體重與身長(zhǎng)、尾長(zhǎng)呈正相關(guān),相關(guān)系數(shù)分別為0.89和0.87(P<0.0001),身長(zhǎng)與尾長(zhǎng)也呈正相關(guān)(r=0.94,P<0.0001);
8、(7)脛骨近端軟骨細(xì)胞G0-G1期的比例在生后7天內(nèi)逐漸升高,S期的比例則逐漸下降;(8)脛骨近端生長(zhǎng)板肥大層軟骨細(xì)胞體積在第3、4、6天增大明顯,其高度逐漸增加,與IGF-I濃度變化趨勢(shì)相似,而增殖層軟骨細(xì)胞高度逐漸減??;(9)脛骨近端生長(zhǎng)板肥大層高度與IGF-I呈正相關(guān)(r=0.35,P=0.01),與體重、身長(zhǎng)和尾長(zhǎng)明顯呈正相關(guān),相關(guān)系數(shù)范圍0.73~0.81(P<0.0001);(10)脛骨長(zhǎng)度、脛骨骨重、脛骨近端骨骺高度、寬度
9、與體重、身長(zhǎng)、尾長(zhǎng)呈明顯正相關(guān),相關(guān)系數(shù)在0.81~0.99之間(P<0.02),脛骨長(zhǎng)度與其近端骨骺寬度、骨重、近端生長(zhǎng)板肥大層高度、近端骨骺高度呈正相關(guān)(r>0.86,P<0.005),脛骨近端骨骺寬度與其骨重、近端生長(zhǎng)板肥大層高度、近端骨骺高度呈正相關(guān)(r>0.91,P<0.001),脛骨骨重與其近端生長(zhǎng)板肥大層高度、近端骨骺高度也明顯呈正相關(guān)(r>0.86,P<0.005),脛骨近端生長(zhǎng)板肥大層高度與脛骨近端骨骺高度同樣呈明顯正
10、相關(guān)(r=0.94,P=0.0006)。 結(jié)論:(1)再次證實(shí)SD大鼠在生后3天左右出現(xiàn)“兒童期”,即此時(shí)間可能是大鼠生后生長(zhǎng)調(diào)節(jié)機(jī)制轉(zhuǎn)換的時(shí)間,大鼠“兒童期”出現(xiàn)可能主要由IGF-I調(diào)節(jié),IGF-I可能是調(diào)節(jié)大鼠生后線性生長(zhǎng)調(diào)節(jié)機(jī)制轉(zhuǎn)換的主要因子之一;(2)大鼠在生后1周內(nèi),骺端的軟骨生長(zhǎng)可能是以軟骨膜下生長(zhǎng)方式為主,因此用細(xì)胞周期檢測(cè)大鼠脛骨近端生長(zhǎng)板軟骨細(xì)胞生長(zhǎng)情況的方法不太實(shí)用;(3)脛骨近端生長(zhǎng)板肥大層軟骨細(xì)胞與長(zhǎng)骨生
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