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1、叢枝菌根真菌(AMF)是一類廣泛存在的與宿主植物進(jìn)行互利共生的真菌,共生雙方雙向轉(zhuǎn)運(yùn)營養(yǎng)成分,克服各種生物與非生物脅迫。AMF與植物共生是一個精細(xì)的分子調(diào)控過程,從預(yù)共生時期的信號對話,到共生階段的植物脅迫防御、細(xì)胞形態(tài)重塑,每一步都有大量生物分子參與,不同于傳統(tǒng)模式植物百脈根和苜蓿,本研究選用木本豆科植物紫穗槐作為AMF的宿主植物,可能有不同的分子機(jī)制,從轉(zhuǎn)錄水平上篩選AMF與紫穗槐共生相關(guān)基因。
利用轉(zhuǎn)錄組測序技術(shù)篩選AM
2、F在定植紫穗槐的過程中紫穗槐差異表達(dá)基因,經(jīng)過篩查得到差異表達(dá)基因2460個,其中上調(diào)表達(dá)基因881個,下調(diào)表達(dá)基因1579個。排除未知功能基因、只能夠進(jìn)行功能預(yù)測的基因以及表達(dá)量差異較小的基因,并且當(dāng)基因的樣本間差異結(jié)果同時滿足以下幾項(xiàng)條件時:Fold change>l,F(xiàn)DR(q-value)<0.001,至少有一個樣本的RPKM>20,因此通過該標(biāo)準(zhǔn)篩選到顯著差異表達(dá)基因285個,其中上調(diào)基因82個,下調(diào)基因203個。為近一步分析
3、AMF在侵染紫穗槐過程中紫穗槐菌根差異表達(dá)基因的生物學(xué)功能,根據(jù)數(shù)據(jù)庫提供的蛋白信息,GO分類信息,KOG分類信息以及相關(guān)文獻(xiàn)的信息,將顯著上調(diào)的82個差異表達(dá)基因進(jìn)行功能分類,結(jié)果表明,82個差異表達(dá)基因可以被分為以下七大類,分別是:脅迫防御、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、代謝、蛋白折疊與降解、蛋白合成、能量以及轉(zhuǎn)錄。同時對203個下調(diào)基因進(jìn)行進(jìn)一步篩選,篩選標(biāo)準(zhǔn)是Fold change>2,得到更為顯著地下調(diào)基因50個,通過相關(guān)文獻(xiàn)的以及數(shù)據(jù)庫提供的蛋
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