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文檔簡介
1、目的:構(gòu)建膿毒癥大鼠腸道損傷模型,研究HMGB1在膿毒癥大鼠腸道損傷中的作用及表達規(guī)律,探討丙酮酸乙酯對膿毒癥腸道損傷保護作用的機制。
方法:60只清潔級雄性SD大鼠隨機分為假手術(shù)組(S組)、膿毒癥組(C組)和丙酮酸乙酯治療組(M組)。采用盲腸結(jié)扎穿孔方法復(fù)制膿毒癥腸道損傷模型,M組于術(shù)后即刻腹腔注射丙酮酸乙酯溶液(40mg/kg),S組及C組腹腔注射等量乳酸鈉林格氏液。術(shù)后3h、6h、12h、24h從各實驗組取5只大鼠,顯微
2、鏡下觀察腸道損傷情況,并進行病理評分;應(yīng)用分光光度法測定血漿二胺氧化酶(DAO)及D-乳酸含量;采用RT-PCR法檢測HMGB1 mRNA表達,應(yīng)用免疫組織化學(xué)法檢測小腸組織HMGB1蛋白表達。
結(jié)果:1.腸道病理損傷情況:S組各時間點未見明顯腸道損傷,小腸組織病理評分無顯著差別,C組及M組在12h、24h可見明顯腸道損傷,且兩組的小腸組織病理評分隨術(shù)后時間延長呈升高趨勢。C組小腸組織病理評分在6h、12h、24h時間點均高于
3、S組,M組在12h、24h時間點高于S組(P<0.05)。與C組相比,M組小腸組織病理評分在24h顯著改善(P<0.05)。
2.血漿DAO及D-乳酸含量:S組各時間點血漿DAO及D-乳酸含量無明顯差別,C組及M組血漿DAO及D-乳酸含量隨時間的推移呈增高趨勢,且在各時間點均高于S組(P<0.05)。M組在6h、12h、24h的血漿DAO及D-乳酸含量明顯低于C組(P<0.05)。
3.小腸組織HMGB1 mRNA表
4、達:S組小腸組織各時間點HMGB1 mRNA表達無明顯差別,C組及M組小腸組織HMGB1 mRNA表達伴隨時間的增加逐漸升高,在6h、12h、24h均高于S組(P<0.05)。M組小腸組織HMGB1 mRNA表達在6h、12h、24h點均低于C組(P<0.05)。
4.小腸組織HMGB1蛋白表達:S組小腸組織HMGB1表達在各時間點無明顯差別(P>0.05),HMGB1在C組及 M組小腸組織的表達隨時間增加逐漸升高,但M組在2
5、4h升高不顯著。C組及M組在6h、12h、24h HMGB1表達均高于S組(P<0.05)。與C組相比,M組小腸組織的HMGB1表達于12h、24h顯著減少(P<0.05)。
5.小腸組織HMGB1蛋白表達與病理評分相關(guān)性分析:小腸組織HMGB1蛋白表達與病理評分在6h、12h、24h時間點存在顯著相關(guān)性,其相關(guān)系數(shù)分別為0.740、0.614、0.905(P<0.05)。
結(jié)論:膿毒癥大鼠腸道損傷程度與腸組織HMG
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