1、目的：研究NPTX2基因在胰腺癌中的甲基化水平并評價其用于胰腺癌診斷的價值。 方法：在10例胰腺癌組織和10例癌旁正常胰腺組織中，分別應(yīng)用qRT-PCR和SYBR Green熒光摻入QMSP檢測NPTX2 mRNA表達量及CpG島序列的甲基化量。分析甲基化轉(zhuǎn)移酶抑制劑5Aza-dC處理胰腺癌細胞株(PANC-1和ASPCI)前后NPTX2 CpG島序列甲基化修飾和mRNA表達的差異。同時，測序分析NPTX2 CpG島序列的野生型

2、和MSP擴增產(chǎn)物序列。應(yīng)用上述建立甲基化定量檢測方法分析NPTX2甲基化在胰腺癌、慢性胰腺炎及健康志愿者全血和糞DNA中的差異。 結(jié)果：①癌旁正常胰腺組織比胰腺癌組織中的NPTX2基因相對高表達(3.526±3.037 vs.0.276±0.263，P=0.001)，甲基化指數(shù)(MI)相對較低(1.28％±0.98％VS.9.02％±7.52％，P<0.05)。②NPTX2在PANC-1細胞株中不表達，而經(jīng)5Aza-dC處理后明

3、顯高表達；在ASPC1細胞株中雖有表達，但處理后表達量明顯增高。③測序結(jié)果表明AsPC1胰腺癌細胞株中NPTX2 CpG島檢測區(qū)段中存在16個甲基化異化的CpG位點。④NPTX2基因MI在胰腺癌患者全血DNA中顯著高于健康人(1.80％±1.76％vs.0.84％±0.45％)，而糞便DNA暫且未檢到組間差異，有待擴大樣本量進一步研究。 結(jié)論：NPTX2基因的甲基化參與胰腺癌的發(fā)生，檢測其在臨床樣品中的MI可進一步開發(fā)應(yīng)用于胰腺