1、本試驗探討了精卵共培養(yǎng)時間和卵泡液對牛體外受精效果的影響,以及卵泡液、精卵共培養(yǎng)時間、精卵共培養(yǎng)液量、顆粒細胞層數(shù)以及季節(jié)對羊體外受精效果的影響,進-步優(yōu)化了牛羊體外受精技術(shù)條件；本試驗還對冷凍保護劑、冷凍方法、冷凍載體以及胚胎不同發(fā)育階段的冷凍效果等進行了研究。 牛體外受精技術(shù)條件優(yōu)化的研究： (1)受精10 h組的卵裂率和囊胚率均優(yōu)于受精7h組,其中卵裂率差異顯著,囊胚率差異不顯著； (2)在成熟培養(yǎng)液中添加

2、BFF組和SFF組的卵裂率分別為75.41％和63.01％,差異顯著。 牛體外受精胚胎玻璃化冷凍保存的研究： (1)EG組與EG+DMSO組的形態(tài)完整率差異不顯著；EG組與對照組的孵育率差異顯著,雖然EG+DMSO組的孵育率高于EG組,但差異不顯著； (2)早期囊胚經(jīng)OPS法玻璃化冷凍和程序化冷凍法冷凍的孵育率均低于對照組,分別為30.23％、35.56％和39.34％,但差異不顯著,說明采用OPS進行牛早期囊胚

3、玻璃化冷凍能取得與程序化冷凍相當?shù)男Ч?(3)GMS組與0.25ml細管組的形態(tài)完整率差異極顯著,OPS組與0.25ml細管組的形態(tài)完整率差異顯著,但GMS組與OPS組間的差異不顯著,說明0.25ml細管的玻璃化冷凍效果欠佳,OPS和GMS的早期囊胚玻璃化冷凍效果相當,可用OPS取代GMS； (4)桑甚胚組與囊胚組的形態(tài)完整率差異不顯著；?？芭呓M與對照組的孵育率差異顯著,桑堪胚組與囊胚組差異顯著。 (5)桑椹胚

4、組與早期囊胚組形態(tài)完整率差異不顯著；桑椹胚組凍前與凍后平均活力差異顯著,早期囊胚組凍前與凍后平均活力差異顯著,孵化囊胚組凍前與凍后平均活力差異顯著。 綿羊體外受精技術(shù)條件優(yōu)化的研究： (1)在成熟培養(yǎng)液中添加SFF組和BFF組的卵裂率分別為65.23％和60.43％,差異不顯著；囊胚率分別為26.16％和17.11％,差異顯著； (2)受精22 h組、18 h組和12 h組的卵裂率分別為64.85％、54.39％

5、和48.72％,受精22h組和18 h組間差異顯著,受精22 h組和12 h組間差異極顯著； (3)精卵共培養(yǎng)液量為100 ul組的卵裂率和囊胚率均優(yōu)于70 ul組和200ul組,但差異均不顯著； (4)帶有1層～3層顆粒細胞的卵母細胞進行IVF的效果優(yōu)于0層組,兩者的卵裂率和囊胚率均顯著；3層～5層組的卵裂率和囊胚率也優(yōu)于0層組,但兩者差異不顯著； (5)秋季的卵裂率和囊胚率均高于夏季,差異顯著,但秋季與春季相