1、體外受精和早期胚胎培養(yǎng),,第二節(jié)體外受精和早 期胚胎培養(yǎng),榜山中學(xué) 楊美山 2013.5.14,1988年3月10日我國(guó)首例試管嬰兒“神州試管嬰兒之母”張麗珠教授和我國(guó)大陸首例試管嬰兒鄭萌珠,試管嬰兒,1978年7月26日，世界首例試管嬰兒“路易斯．布朗”在英國(guó)誕生，現(xiàn)已成為母親。,根據(jù)資料回答下列問(wèn)題：1.資料上用到了什么生物技術(shù)？ 試管嬰兒技術(shù)（包括體外受精、胚胎體外培養(yǎng)）和胚胎移植技術(shù)。2.試管嬰兒和母親正常懷孕

2、，生產(chǎn)的過(guò)程有何異同？相同之處：都通過(guò)有性生殖產(chǎn)生，在母體子宮內(nèi)發(fā)育形成胎兒。不同之處：受精作用在體外，并在體外發(fā)育成早期胚胎進(jìn)行胚胎移植。,存在困難：1、引進(jìn)一頭良種成年奶牛需要3萬(wàn)－5萬(wàn)元。2、牛的生育率低，一頭牛一胎只一個(gè)，一生 只能生育四五次。（牛的妊娠期約280天）,討論1：是否有可能讓引進(jìn)的良種?？焖俅罅康姆敝?？為什么？,牛的生育率雖然很低，但是牛的卵母細(xì)胞卻相當(dāng)?shù)亩?，其卵巢中卵母?xì)胞數(shù)目要比一生中排卵數(shù)多1

3、000倍左右。公牛產(chǎn)生的精子數(shù)目就更多了（精子數(shù):50億/mL),理論基礎(chǔ)：,討論2：如何讓引進(jìn)的良種?？焖俅罅康姆敝?？,試管動(dòng)物技術(shù),是指通過(guò)人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精，并通過(guò)培養(yǎng)發(fā)育成早期胚胎后，再經(jīng)移植產(chǎn)生后代的技術(shù)。,快速繁殖動(dòng)物優(yōu)良品種,目的：,技術(shù)手段：,體外受精和早期胚胎培養(yǎng),試管動(dòng)物技術(shù)的三個(gè)基本操作環(huán)節(jié)：,第一步：體外受精,第二步：胚胎的早期培養(yǎng),第三步：胚胎移植,精子,卵子,,,受精卵,,早期胚

4、胎,,幼體,①,②,③,,新個(gè)體,哺乳動(dòng)物個(gè)體發(fā)育過(guò)程,試管 動(dòng)物,思考：子代數(shù)目的多少取決于精子數(shù)還是卵子數(shù)？,方法1：給供體注射促性腺激素，使一頭母畜的卵巢一次排出比自然情況下多幾倍到十幾倍的卵子（超數(shù)排卵），之后從輸卵管中沖取卵子，直接與獲能的精子在體外受精。,方法2-1：從屠宰場(chǎng)得到的廢棄牛卵巢中采集卵母細(xì)胞,借助超聲波探測(cè)儀、內(nèi)窺鏡或腹腔鏡等的引導(dǎo)，從活母畜卵巢采集卵母細(xì)胞。操作員先將帶有超聲波探頭和吸卵針的采卵器通過(guò)生殖道插

5、入子宮，同時(shí)將探頭貼在卵巢上。根據(jù)B超屏幕所顯示的卵泡位置，利用采卵針穿刺卵泡并同時(shí)抽吸卵母細(xì)胞。,方法2-2：從活體卵巢中采集卵母細(xì)胞,比較兩種方法采集的卵母細(xì)胞在體外受精前的處理有所不同，為什么？,比較兩種方法采集的卵母細(xì)胞在體外受精前的處理有所不同，為什么？,2.精子的收集和獲能,1)收集的方法:假陰道法,手握法和電刺激等2)獲能處理: 培養(yǎng)法：把精子放入獲能液中。 （嚙齒動(dòng)物、家兔和豬）化學(xué)法：把

6、精子放入一定濃度肝素等溶液中。 （牛、羊）,3.受精,在獲能溶液或?qū)Ｓ玫氖芫芤褐型瓿墒芫^(guò)程,離心的目的是什么？,,卵母細(xì)胞的培養(yǎng)的目的是什么？,,CO2培養(yǎng)箱,,二、胚胎的早期培養(yǎng),復(fù)習(xí)：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件是什么？,二、胚胎的早期培養(yǎng),,發(fā)育培養(yǎng)液成分 :,水、無(wú)機(jī)鹽、有機(jī)鹽、維

7、生素、激素、氨基酸、核苷酸以及動(dòng)物血清等.,牛、羊：桑椹胚或囊胚小鼠、家兔：卵裂期或囊胚試管嬰兒：8個(gè)或16個(gè)細(xì)胞階段,胚胎培養(yǎng)發(fā)育到適宜階段時(shí)，可將其取出向受體移植。注意：不同動(dòng)物胚胎移植的時(shí)間不同,為充分利用屠宰母畜卵巢上的卵母細(xì)胞，不妨將屠宰場(chǎng)和“胚胎工廠(chǎng)”合建。這樣屠宰場(chǎng)的產(chǎn)品就不僅是鮮肉，還會(huì)生產(chǎn)出大量的胚胎和胚胎工程所需的原材料，你看這個(gè)想法可行嗎？,奇思妙想,采集良種母牛的卵母細(xì)胞,,卵母細(xì)胞的體外培養(yǎng),采集良種公牛

8、精子,,精子體外獲能,體外受精,,良種牛體外受精胚胎,,胚胎移植,受體牛,,良種犢牛,,成熟期牛,,屠宰加工廠(chǎng),,市場(chǎng),,采集卵巢中的卵母細(xì)胞,,“試管牛”工廠(chǎng)化生產(chǎn)的技術(shù)流程圖,,,保存剩余的卵子和精子的方法是什么？,試管動(dòng)物 與 克隆動(dòng)物相比生殖方式：技術(shù)手段：遺傳規(guī)律：,有性生殖 無(wú)性生殖,核移植技術(shù)、胚胎移植,遵循 無(wú),體外受精胚胎移植,胚胎移植,采集良種母牛

9、的卵母細(xì)胞,,卵母細(xì)胞的體外培養(yǎng),采集良種公牛精子,,精子體外獲能,體外受精,,良種牛體外受精胚胎,,受體牛,,良種犢牛,,成熟期牛,屠宰加工廠(chǎng),,市場(chǎng),,采集卵巢中的卵母細(xì)胞,,“試管?！惫S(chǎng)化生產(chǎn)的技術(shù)流程圖,,1 哺乳動(dòng)物的體外受精主要包括___________，___________和_______等主要步驟。,卵母細(xì)胞的采集,精子的獲取,受精,2 收集精子的方法①___________：②___________：③___

10、________：,假陰道法,手握法,電刺激法,3 對(duì)家畜進(jìn)行卵母細(xì)胞采集時(shí)，可用( )處理促性腺激素 B. 促性腺激素釋放激素 C. 肝素 D. 性激素,,4 從活體動(dòng)物的卵巢中直接采卵時(shí)，不正確的方法是超聲波探測(cè)儀 B. 內(nèi)窺鏡 C. 腹腔鏡 D. 陰道鏡,,5 體外受精的場(chǎng)所A.在水溶液中 B.在鹽溶液中C.在獲能溶液或