1、乳腺癌是我國(guó)女性常見(jiàn)的一種惡性腫瘤，抑癌基因的缺失或表達(dá)失調(diào)是乳腺癌發(fā)生、發(fā)展和侵襲轉(zhuǎn)移的重要原因之一。10號(hào)染色體上磷酸酶與張力蛋白同源缺失基因(phosphatase and tensinhology deleted from chromosome10，PTEN)又稱多種進(jìn)展期癌中病變基因(mutated in multiple advanced cancers，MMACl)或TGF-B調(diào)節(jié)的上皮細(xì)胞富含的磷酸酶基因(TGF-reg

2、ulated and epithelialcell-enriched phosphatase1，TEPl)，是1997年由Steck等3個(gè)研究小組分別用不同的方法克隆到的第一個(gè)具有磷酸酶活性的抑癌基因。該基因定位于10q23.3，廣泛表達(dá)于各種正常組織，但在包括乳腺癌的許多腫瘤中表達(dá)缺失或降低。
　　 大量研究發(fā)現(xiàn)，PTEN在乳腺發(fā)育及乳腺癌發(fā)生中起重要作用。PTEN表達(dá)下調(diào)或者缺失導(dǎo)致乳腺過(guò)度發(fā)育并較早發(fā)生腫瘤，而野生型PTE

3、N過(guò)表達(dá)則抑制了乳腺發(fā)育。PTEN+/-小鼠可自發(fā)乳腺癌，并且PTEN+/-小鼠與MMTV-wnt-1轉(zhuǎn)基因小鼠雜交后代發(fā)生乳腺癌比親代種系要早。在乳腺腫瘤標(biāo)本中PTEN突變或雜合性丟失(loss of heterozygosity，LOH)較為常見(jiàn)。有報(bào)道野生型PTEN通過(guò)下調(diào)PI3K水平誘導(dǎo)G1期阻滯促進(jìn)細(xì)胞凋亡，從而抑制了乳腺癌細(xì)胞生長(zhǎng)并引起細(xì)胞死亡。
　　 目前對(duì)PTEN的表達(dá)、信號(hào)傳導(dǎo)及在多種腫瘤中的地位和作用的研究正

4、方興未艾。進(jìn)一步研究PTEN基因在乳腺癌發(fā)生發(fā)展過(guò)程中的作用及其機(jī)制以及與其他相關(guān)基因的相互作用，對(duì)于在基因水平上進(jìn)行乳腺癌的診斷、治療及預(yù)后判斷具有重要的臨床意義。
　　 基于以上理念，為探討PTEN基因在乳腺癌細(xì)胞中的表達(dá)及對(duì)細(xì)胞生物學(xué)行為特性的影響，我們?cè)O(shè)計(jì)并進(jìn)行了如下實(shí)驗(yàn)研究：選擇PTEN正常表達(dá)的細(xì)胞株MDA-MB-231(M231)，使用ShRNA方法沉默PTEN的表達(dá)，構(gòu)建成PTEN低表達(dá)的M231細(xì)胞株(M231

5、-1548和M231-3001)及對(duì)照組細(xì)胞(M231-scramble)，通過(guò)Western-blot分析、細(xì)胞基質(zhì)黏附試驗(yàn)、細(xì)胞侵襲能力分析和細(xì)胞克隆形成分析等方法檢測(cè)PTEN基因沉默后，M231乳腺癌細(xì)胞株黏附、遷移及增殖能力的改變。
　　 結(jié)果：與對(duì)照組(seramble-shRNA)相比，PTEN-shRNA1548和PTEN-shRNA3001可明顯地沉默PTEN基因的表達(dá)，從而構(gòu)建成PTEN低表達(dá)的M231細(xì)胞株（

6、M231-1548和M231-3001）。而且PTEN表達(dá)低的細(xì)胞（M231-1548和M231-3001)粘附率明顯低于實(shí)驗(yàn)對(duì)照組(M231-scramble)，在相同的時(shí)間侵入并跨越基質(zhì)膜的能力更高，在三維膠內(nèi)繁殖增生、形成克隆的能力較對(duì)照組細(xì)胞(M231-scramble)明顯，兩者差異均有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.Ol)。
　　 結(jié)論：PTEN基因表達(dá)降低可促進(jìn)細(xì)胞增生、繁殖和存活，降低細(xì)胞黏附力，促進(jìn)細(xì)胞遷移和侵襲。因