1、目的：探討C57小鼠脂肪源間充質(zhì)干細(xì)胞在體外對小鼠造血干/祖細(xì)胞擴(kuò)增的影響。
　　方法：無菌條件下獲取C57BL/6小鼠的脂肪源干細(xì)胞（ADSCs）和骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（BMSCs），培養(yǎng)至P3代：細(xì)胞形態(tài)學(xué)分析；流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞表面免疫表型；脂肪源干細(xì)胞定向成骨、成脂、成軟骨細(xì)胞誘導(dǎo)。將小鼠脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞、骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞經(jīng)絲裂霉素C處理后作為滋養(yǎng)層，以C57小鼠造血干細(xì)胞Lin-Sca-1+C-kit+（LSK）作為長期培養(yǎng)

2、起始細(xì)胞（LTC-IC），對其進(jìn)行35天長期體外共培養(yǎng)，將本實驗分3組：A組：LSK加小鼠脂肪源細(xì)胞，B組：LSK加骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（BMSCs），C組：LSK單獨培養(yǎng)；分別于0 d、14d、35d觀察造血集落生長、流試分析、甲基纖維素14 d處理分析造血干/祖細(xì)胞集落增殖狀態(tài)；利用掃描電鏡檢測與ADSCs或BMSCs飼養(yǎng)層共培養(yǎng)2周或5周的LSK細(xì)胞的形態(tài)；同時應(yīng)用熒光定量PCR計數(shù)檢測共培養(yǎng)后LSK的Notch信號相關(guān)基因Jagge

3、d-1、Jagged-2、Notch1、Notch2的mRNA表達(dá)水平。
　　結(jié)果：1 ADSCs、BMSCs的生物學(xué)分析：ADSCs、BMSCs在體外呈梭形生長并可穩(wěn)定傳代；成骨、成脂、成軟骨誘導(dǎo)均為陽性；流式結(jié)果分析ADSCs與BMSCs均表達(dá)CD29、CD105、Sca-1，均不表達(dá)CD34、CD133，但 BMSCs高表達(dá) CD45。2細(xì)胞體外二維共培養(yǎng)后對 LSK擴(kuò)增的影響：①ADSCs可以有效促進(jìn)LSK細(xì)胞體外擴(kuò)增；②