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![菜豆普通細(xì)菌性疫病抗病基因發(fā)掘與定位.pdf_第1頁(yè)](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/1/8/8a2c4e8b-138e-425e-9484-f44c027aba9d/8a2c4e8b-138e-425e-9484-f44c027aba9d1.gif)
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文檔簡(jiǎn)介
1、菜豆普通細(xì)菌性疫病是目前普通菜豆生產(chǎn)中的重要病害,嚴(yán)重威脅著普通菜豆生產(chǎn)。篩選抗病種質(zhì)資源、開(kāi)發(fā)與抗性基因緊密連鎖的分子標(biāo)記、克隆抗病基因、選育和種植抗病品種等,是防治菜豆普通細(xì)菌性疫病的最經(jīng)濟(jì)安全有效的方法。為發(fā)掘我國(guó)普通菜豆資源中的抗病基因,本文從資源鑒定、作圖群體構(gòu)建、遺傳圖譜構(gòu)建、抗病QTL檢測(cè)等方面,開(kāi)展菜豆普通細(xì)菌性疫病抗病性研究,主要取得如下進(jìn)展:
1.普通菜豆種質(zhì)資源抗病性鑒定
采用針刺葉片法接種、溫
2、室地面水層保濕方式,對(duì)661份普通菜豆種質(zhì)資源進(jìn)行抗菜豆普通細(xì)菌性疫病鑒定和評(píng)價(jià),結(jié)果表明,采用的接種方法簡(jiǎn)便實(shí)用,保濕方式效果良好,從661份普通菜豆種質(zhì)中篩選出抗病種質(zhì)5份、中抗種質(zhì)82份、感病種質(zhì)400份、高感種質(zhì)174份。
2.分離群體的構(gòu)建
利用抗病材料龍蕓豆5號(hào)和感病材料龍蕓豆4號(hào)配制雜交組合,獲得包含463個(gè)單株的F2分離群體;采用針刺葉片接種法、溫室地面水層保濕的方式進(jìn)行抗病性鑒定,在接種后14d和2
3、1d,群體調(diào)查結(jié)果的偏度絕對(duì)值均小于1,該群體鑒定結(jié)果適于進(jìn)行QTL定位。
3.連鎖圖譜的構(gòu)建
依據(jù)普通菜豆全基因組序列開(kāi)發(fā)了2,802對(duì)SSR引物,獲得168個(gè)親本間具有多態(tài)性的標(biāo)記;從1,381個(gè)公共標(biāo)記中,篩選獲得49個(gè)親本間具有多態(tài)性的標(biāo)記。利用217個(gè)多態(tài)性標(biāo)記,分別對(duì)5個(gè)F1(龍4×龍5)單株的自交后代即F2群體進(jìn)行遺傳分析,去除嚴(yán)重偏分離的標(biāo)記后,利用軟件QTL IciMapping v4.0分別構(gòu)建遺
4、傳連鎖圖,并將這些連鎖圖整合到一張圖譜上,得到212個(gè)SSR標(biāo)記覆蓋的整合遺傳圖譜。
4.抗病QTL的定位及遺傳效應(yīng)分析
結(jié)合表型和基因型鑒定結(jié)果,利用QTL IciMapping v4.0軟件在接種后14d和21d同時(shí)檢測(cè)到兩個(gè)QTL。位于B08染色體的p8s214與p8s193標(biāo)記之間的QTL在14d和21d分別解釋4.2%和3.8%的表型變異;位于B11染色體的p11s225與p11s229標(biāo)記之間的QTL在1
5、4d和21d分別解釋9.2%和5.7%的表型變異。
通過(guò)上位性分析,接種后14 d和21d分別發(fā)現(xiàn)35對(duì)和58對(duì)具有互作效應(yīng)的QTL,其中有2對(duì)(E-Q1和E-Q2)在14 d和21 d同時(shí)被檢測(cè)到,分別位于p8s192/BMg985和p3s3/p3s9、p3s262/p3s185和BMg1叭9/p4s19位點(diǎn)之間;在14d和21 d,E-Q1分別解釋18.8%和43.5%的表型變異,E-Q2分別解釋24.8%和50.4%的表
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