光合細(xì)菌對(duì)雞腸道菌群多樣性的影響及富硒顆粒劑的初步研究.pdf_第1頁(yè)
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1、光合細(xì)菌(PSB)是一類能在厭氧光照條件下利用有機(jī)物作供氧體兼碳源,進(jìn)行不放氧光合作用的細(xì)菌。腸道菌群是機(jī)體腸道內(nèi)存在的一群當(dāng)機(jī)體處于健康狀態(tài)時(shí),不會(huì)表現(xiàn)出異?;蛑虏‖F(xiàn)象,并具有重要生理功能的微生物。本試驗(yàn)的光合細(xì)菌是活菌的形式進(jìn)入機(jī)體腸道內(nèi),會(huì)影響機(jī)體的腸道菌群的變化。 硒是一種重要的營(yíng)養(yǎng)微量元素,而我國(guó)是一個(gè)土壤普遍缺硒的國(guó)家,因此補(bǔ)硒對(duì)人和動(dòng)物來說都是一件很重要的事。無機(jī)硒吸收難,毒性大,利用光合細(xì)菌將無機(jī)硒轉(zhuǎn)化為吸收好,

2、無毒性的有機(jī)硒,既發(fā)揮了光合細(xì)菌的生物學(xué)功能,又同時(shí)補(bǔ)充了硒,因此,本試驗(yàn)對(duì)光合細(xì)菌轉(zhuǎn)化富硒的培養(yǎng)條件進(jìn)行了研究。 1.光合細(xì)菌對(duì)雞腸道菌群多樣性的影響 目的:了解正常雞的腸道菌群多樣性變化規(guī)律,及光合細(xì)菌對(duì)雞腸道回、盲、直3個(gè)腸段腸道菌群多樣性的影響。方法:對(duì)照組分別選取0、3、10、20、30、40、50日齡雞,飼喂光合細(xì)菌的試驗(yàn)組分別選取第10、20、40(40日齡后停喂光合細(xì)菌)、50日齡雞為樣本,采用PCR-D

3、GGE法以及對(duì)10日齡回腸段DGGE圖譜特殊條帶進(jìn)行回收克隆測(cè)序來對(duì)其腸道菌群多樣性變化進(jìn)行分析。結(jié)果:回腸段的對(duì)照組多樣性指數(shù)變化趨勢(shì)為:30日齡前,隨日齡增加多樣性指數(shù)由低逐漸升高,30日齡達(dá)到峰值后開始下降,40日齡后又有所回升,盲腸段的對(duì)照組多樣性指數(shù)變化趨勢(shì)為:10日齡前,隨日齡增加多樣性指數(shù)由低逐漸升高,10~30日齡是一平臺(tái)期,30日齡后開始下降,直腸段的對(duì)照組多樣性指數(shù)變化趨勢(shì)為;20日齡前,隨日齡增加多樣性指數(shù)由低逐漸

4、升高,20日齡達(dá)到峰值后開始下降,30日齡后又有所回升;回腸段的光合細(xì)菌組多樣性指數(shù)變化趨勢(shì)為:10日齡多樣性指數(shù)最高,10~40日齡持續(xù)下降,停喂光合細(xì)菌后有所回升,盲腸段的光合細(xì)菌組多樣性指數(shù)變化趨勢(shì)為:10~20日齡緩慢升高,20日齡達(dá)到最高后持續(xù)下降,直腸段的光合細(xì)菌組多樣性指數(shù)變化趨勢(shì)為;10日齡多樣性指數(shù)最高,10~40日齡持續(xù)下降,停喂光合細(xì)菌后有所回升;光合細(xì)菌組和對(duì)照組相比,多樣性指數(shù)下降趨勢(shì)更劇烈,均有向低于對(duì)照組多

5、樣性指數(shù)的趨勢(shì)發(fā)展。10日齡測(cè)序結(jié)果得到了與乳酸菌、腸球菌、假單胞菌和大腸桿菌4種可培養(yǎng)的細(xì)菌的16S rRNA基因具有同源性的序列,3組序列與未可培養(yǎng)細(xì)菌的16S rRNA基因具有同源性的序列,光合細(xì)菌組比對(duì)照組多的一條帶的序列與大腸桿菌和未可培養(yǎng)的變形菌門細(xì)菌的16S rRNA基因具有同源性。結(jié)論:雞正常腸道菌群多樣性是一個(gè)動(dòng)態(tài)變化的過程,同時(shí)光合細(xì)菌對(duì)雞腸道各區(qū)段的菌群多樣性在飼喂的不同時(shí)間有著不同程度的影響,光合細(xì)菌有利于縮短腸

6、道菌群多樣性達(dá)到峰值的時(shí)間,但長(zhǎng)期(超過10~20天)飼喂光合細(xì)菌就會(huì)降低腸道菌群的多樣性,因此不適合連續(xù)飼喂。雞10日齡時(shí),回腸段腸道正常菌群基本建立,其中除了通常認(rèn)識(shí)的可培養(yǎng)的細(xì)菌外,還有一部分未可培養(yǎng)的細(xì)菌。 2.光合細(xì)菌富硒條件的研究 目的:篩選出光合細(xì)菌高效率轉(zhuǎn)化富集硒的培養(yǎng)條件。方法:采用氫化物發(fā)生-原子熒光光度法測(cè)定硒含量,以亞硒酸鈉添加量、細(xì)菌接種量和培養(yǎng)時(shí)間作為試驗(yàn)因素,由單因素試驗(yàn)選取3個(gè)不同水平設(shè)計(jì)

7、正交試驗(yàn)。結(jié)果:正交試驗(yàn)得出培養(yǎng)時(shí)間和亞硒酸鈉添加量為影響光合細(xì)菌富硒能力的重要因素,三個(gè)因素的F值均不顯著。結(jié)論:最佳富硒培養(yǎng)條件是亞硒酸鈉添加量為100μg/mL、細(xì)菌接種量為15%以及培養(yǎng)時(shí)間為5天。 3.光合細(xì)菌富硒顆粒劑的制備研究 目的:把寓硒的光合細(xì)菌制成顆粒劑,并了解其穩(wěn)定性和補(bǔ)硒效果。方法:采用濕法制粒法制備顆粒劑,根據(jù)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)光合細(xì)菌富硒顆粒劑的質(zhì)量,并采用平板稀釋法測(cè)定其40℃、50℃、60℃不同

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