1、論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：所呈交的學(xué)位論文是我個(gè)人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行研究工作所取得的成果。盡我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，學(xué)位論文中不包含其他個(gè)人或集體己經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)過(guò)的研究成果，也不包含為獲得四JlI農(nóng)業(yè)大學(xué)或其它教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書(shū)所使用過(guò)的材料。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均己在論文中作了明確的說(shuō)明并表示了謝意。研究生簽名：鋅球求如f◇年∥月f≥日關(guān)于論文使用授權(quán)的聲明本人完全了解四川農(nóng)業(yè)大學(xué)有關(guān)保留、使

2、用學(xué)位論文的規(guī)定，即：學(xué)校有權(quán)保留并向國(guó)家有關(guān)部門(mén)或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱和借閱，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。同意四川農(nóng)業(yè)大學(xué)可以用不同方式在不同媒體上發(fā)表、傳播學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容。出論文不保密。口本論文保密，在一年解密后適用本授權(quán)。(請(qǐng)?jiān)谝陨峡趦?nèi)劃“√”)研究生簽名：餌沫威導(dǎo)師簽名：功f≯年《只乙B詢(xún)f留年6冠|LB四川農(nóng)業(yè)大學(xué)2014屆碩士學(xué)位論文溶菌酶對(duì)圍產(chǎn)期奶牛直腸菌群多樣性

3、的影響摘要根據(jù)奶牛的不同生理特性和飼養(yǎng)方案，將整個(gè)泌乳周期劃分為6個(gè)階段。干奶后期(產(chǎn)前3周)到泌乳初期(產(chǎn)后3周)稱(chēng)為圍產(chǎn)期。受生理因素的影響，圍產(chǎn)期奶牛采食量下降，造成攝入的食物不能滿(mǎn)足泌乳所需的能量，導(dǎo)致能量負(fù)平衡。嚴(yán)重的能量負(fù)平衡會(huì)引起奶牛酮病和脂肪肝等疾病，使奶牛的免疫力和繁殖力下降，這樣容易并發(fā)生產(chǎn)后癱瘓、乳房炎、胎衣不下、子宮內(nèi)膜炎等病癥，給奶牛業(yè)帶來(lái)嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。胄腸道正常菌群與機(jī)體的營(yíng)養(yǎng)、代謝和免疫等緊密相關(guān)，減少?lài)?/p>

4、產(chǎn)期奶牛因生理變化對(duì)胃腸道菌群影響有重要意義。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)在圍產(chǎn)期階段給奶牛飼喂溶菌酶，運(yùn)用ERICPCR指紋圖譜及RFLP分型技術(shù)，分析溶菌酶對(duì)圍產(chǎn)期奶牛腸道菌群多樣性的影響，探討溶菌酶對(duì)圍產(chǎn)期奶牛腸道菌群的調(diào)節(jié)作用。實(shí)驗(yàn)將9頭奶牛隨機(jī)分為3組，I組為對(duì)照組(正常飼喂組)，II組為每天每頭添加飼喂2g溶菌酶組，Ⅲ組為每天每頭添加飼喂4g溶菌酶組；分別在產(chǎn)前21天、產(chǎn)前14天、產(chǎn)前7天、產(chǎn)犢日、產(chǎn)后7天、產(chǎn)后14天、產(chǎn)后21天采集直腸糞便

5、；分別對(duì)每一組采集的奶牛糞便細(xì)菌總DNA進(jìn)行ERIC—PCR指紋圖譜分析，找出主要條帶，克隆回收，再使用Hinfl和Hhal兩種限制性?xún)?nèi)切酶進(jìn)行RfLP分析，對(duì)主要的OTU進(jìn)行測(cè)序分析。研究結(jié)果如下：1ERICPCR指紋圖譜聚類(lèi)分析顯示，在圍產(chǎn)期內(nèi)三組奶牛直腸菌群結(jié)構(gòu)相似性對(duì)照組與2g溶菌酶組相近，與4g溶菌酶組相似性較低。圖譜多樣性分析顯示，三組奶牛直腸茵群的多樣性都是產(chǎn)前大于產(chǎn)后。而飼喂4g溶菌酶組在產(chǎn)犢日，奶牛直腸菌群多樣性顯著增

6、加，明顯差異于對(duì)照組(P0，05)。表明，圍產(chǎn)期奶牛直腸菌群在圍產(chǎn)期是不斷變化的，溶菌酶對(duì)圍產(chǎn)期奶牛的直腸菌群多樣性有影響。2對(duì)ERICPCR指紋圖譜中三組膠回收的主要條帶進(jìn)行克隆、分型和測(cè)序，結(jié)果顯示：三組有一相同的主條帶(約600bp)，分別克隆所得到的OTU個(gè)數(shù)，對(duì)照組為32個(gè)，2g溶菌酶組為21個(gè)，4g溶菌酶組為25個(gè)，條帶所包含的細(xì)菌序列數(shù)在飼喂溶菌酶后有所降低；測(cè)序結(jié)果該條帶包含的主要優(yōu)勢(shì)菌群都為擬桿菌。對(duì)照組與2g溶菌酶組