1、細(xì)菌素(bacteriocin)是某些細(xì)菌產(chǎn)生的抑菌肽或蛋白，這些物質(zhì)可以殺滅和抑制與之相同或相似生境的其他微生物。雖然許多細(xì)菌都能產(chǎn)生細(xì)菌素，但乳酸菌產(chǎn)生的細(xì)菌素更適合在食品工業(yè)中應(yīng)用?，F(xiàn)在只有幾種商品化的細(xì)菌素，如nisin，nisin作為食品添加劑可以非常有效的抑制許多食品中的腐敗菌，并延長(zhǎng)其貨價(jià)期。但由于其不能抑制革蘭氏陰性菌和抑菌活性的不穩(wěn)定限制了它在食品工業(yè)與飼料工業(yè)中的發(fā)展，所以我們要繼續(xù)大力開(kāi)發(fā)其他乳酸菌細(xì)菌素。

2、 本文從自然的酸菜發(fā)酵液中挑選分離出形態(tài)良好的8株菌落菌株進(jìn)行初篩，通過(guò)抑菌實(shí)驗(yàn)，選取抑菌最大的菌株作為誘變出發(fā)菌株LABR，經(jīng)微生物常規(guī)鑒定方法初步鑒定LABR為植物乳桿菌(Lactobacillus plantarum)。利用紫外線與硫酸二乙酯對(duì)LABR多輪復(fù)合誘變篩選出抑菌活性最強(qiáng)的菌株LABR-X，在排除有機(jī)酸和過(guò)氧化氫的干擾后，離心濃縮后的發(fā)酵液對(duì)指示菌有強(qiáng)烈的抑制作用。 優(yōu)化菌株LABR-X的培養(yǎng)條件，通過(guò)正交實(shí)驗(yàn)確

3、定了最佳培養(yǎng)條件：培養(yǎng)溫度為37℃，MRS培養(yǎng)基的初始pH值為6，接種量為5％(V/V)，裝液量為60％。在該培養(yǎng)條件下，LABR-X的生長(zhǎng)穩(wěn)定期為18～26小時(shí)。LABR-X發(fā)酵液經(jīng)蛋白酶穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，發(fā)酵液中的抑菌物質(zhì)對(duì)胰蛋白酶和蛋白酶K敏感，同時(shí)結(jié)合水合茚三酮反應(yīng)和雙縮脲反應(yīng)得到的陽(yáng)性結(jié)果，充分證明LABR-X的發(fā)酵液中的抑菌物質(zhì)含有多肽類物質(zhì)成分，即乳桿菌素。 按照蛋白質(zhì)物質(zhì)提取純化原理，LABR-X發(fā)酵產(chǎn)物經(jīng)硫酸銨鹽

4、析法粗提、弱酸性陽(yáng)離子交換樹(shù)脂層析純化、Tricine-SDS-PAGE電泳分離等方法提取精制乳桿菌素，通過(guò)透析袋處理得到的抑菌活性最大的乳桿菌素組分分子量約20.1kDa，其效價(jià)為nisin的2倍，經(jīng)氨基酸分析儀檢測(cè)乳桿菌素中含有13種氨基酸和5種未知寡肽。 利用光學(xué)顯微鏡與掃描電鏡菌體形態(tài)觀察、堿性磷酸酶活性測(cè)定和β-半乳糖苷酶活性測(cè)定等方法，對(duì)乳桿菌素抑菌機(jī)理進(jìn)行了初步研究與探討，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示乳桿菌素能夠破壞指示菌的細(xì)胞壁