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文檔簡介
1、 本文第一部分目的是成功構建針對大鼠活化T淋巴細胞可誘導共刺激分子(ICOS)基因編碼區(qū)的小干擾RNA(siRNA)表達質粒pICOS,觀察其對大鼠活化T淋巴細胞表面ICOS表達的影響。方法:設計針對大鼠活化T淋巴細胞ICOS的siRNA,構建重組干擾質粒pICOS-A及其陰性對照質粒pICOS-B,并經(jīng)酶切及測序鑒定,用脂質體轉染大鼠T淋巴細胞,RT-PCR檢測其對T細胞ICOS基因表達的抑制作用。結論:大鼠ICOS的siRNA
2、具有明顯和特異性的抑制活化T淋巴細胞ICOS基因表達的作用。第二部分研究利用RNAi阻斷T淋巴細胞ICOS共刺激通路在大鼠原位肝移植急性排斥反應中的作用。方法:將大鼠原位肝移植18例,隨機分成干擾組、排斥組和對照組,觀察各組BN鼠1周存活率,檢測CD25和ICOS在T細胞中的陽性率,檢測肝組織細胞凋亡情況,以及T細胞ICOS基因的表達,并檢測T細胞ICOS蛋白的表達和血清TNF-α、IFN-γ含量。結論:應用RNAi技術,術中回輸已轉染
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