NF-κB對D-gal誘導擬老化大鼠聽覺系統(tǒng)脫髓鞘調控的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、第一部分D-gal誘導擬老化大鼠聽覺系統(tǒng)脫髓鞘的探討與研究
  目的:探索D-gal誘導擬老化大鼠聽覺系統(tǒng)脫髓鞘情況。
  方法:購自武漢大學動物中心200只3周齡的SD大鼠,22~24℃恒溫動物房中適應性喂養(yǎng)1周,隨機分成實驗組和對照組各100只。實驗組予D-gal(150mg/kg/d)頸部皮下注射,對照組注射同等劑量生理鹽水,實驗組與對照造模時間為8周。造模完成后讓大鼠適應性的喂養(yǎng)1周。隨機抽取實驗組和對照組各10只大

2、鼠,鹽酸氯胺酮(30mg/kg)和氯丙嗪(15mg/kg)腹腔注射麻醉測量ABR。分別測量左右耳的聽閾。然后給予4KdB,8KdB,12KdB,20KdB,24KdB,32KdB,40KdB的click刺激并記錄。4%的水合氯醛(0.35mg/kg)腹腔注射麻醉后,處死取下耳蝸組織,對髓鞘和神經元細胞進行染色,在熒光顯微鏡下觀察比對實驗組和對照組同一部位髓鞘和神經元數(shù)量和密度情況。
  結果:ABR檢測顯示:實驗組大鼠的click

3、閾值稍高于對照組,分頻顯示實驗組高頻聽力損傷明顯,有統(tǒng)計學差異。打藥后1周,耳蝸切片染色示,在底回處,實驗組神經元密度和數(shù)量較對照組少,而髓鞘則變化不明顯。中回和頂回切片染色中無論是神經元細胞和髓鞘在數(shù)量和密度上均無差異。
  結論:實驗組ABR閾值較對照組稍高,聽力損傷測試有統(tǒng)計學差異。切片染色耳蝸底回的髓鞘和神經元細胞的密度和數(shù)量減少,而在中回和頂回處,神經元細胞細胞和髓鞘在密度和數(shù)量上均無差異,推測老齡化大鼠是從耳蝸底回開始

4、病變,經中回向頂回發(fā)展。需要進一步擴大樣本量證實該結論,同時也需要向后推遲實驗時間節(jié)點,繼續(xù)行連續(xù)切片染色,證實病變按照底回和中回病變的時間順序。
  第二部分NF-κB對D-gal誘導擬老化大鼠聽覺中樞脫髓鞘調控的研究
  目的:NF-κB對D-gal誘導擬老化大鼠聽覺中樞脫髓鞘調控的研究
  方法:隨機取打完藥后1周的實驗組和對照組大鼠各6。本部分實驗的另外一個實驗時間節(jié)點是13周大鼠。4%的水合氯醛(0.35mg

5、/kg)腹腔注射麻醉大鼠。處死取大鼠聽皮層,海馬,下丘組織,進行NF-κB的western blot分析,用Image J或photo shop軟件計算實驗組與對照組的NF-κB條帶的灰度值,計算與內參的比值比,制成灰度直方圖,用spss17.0進行統(tǒng)計學分析。
  結果:打完藥1周后的實驗組和對照組的NF-κB的western blot的灰度比值比,經spss17.0進行統(tǒng)計學分析,聽皮層、海馬、下丘的P值均大于0.05,無統(tǒng)計

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